摘要
虎杖为蓼科植物虎杖的根茎和根,分布较广泛。虎杖中主要含有白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素等物质,其中白藜芦醇具有抗氧化、抗自由基的作用、抑制和治疗组织癌变和肿瘤等生物活性。因此,对虎杖中的白藜芦醇进行提取具有很大的医用价值和市场前景。本文选择虎杖作为研究对象,探索虎杖中白藜芦醇的提取纯化工艺,并进行中试放大,为企业生产提供有价值的参考数据。 本研究建立了以高效液相色谱法(HPLC法)为主,薄层层析法(TLC法)为辅,进行分析检测白藜芦醇的方法。其中HPLC法精度最高,主要用于产品含量的测定。其检测条件为色谱柱:DiamonsilC18;流动相:乙腈∶水(25∶75);检测波长:306nm;流速:1.0mL/min;柱温:25℃;进样量:5μL。而TLC法可用于工业生产的定性检测,方便、快速、有效。 对虎杖中白藜芦醇提取进行了单因素试验,并运用DesignExpert软件对虎杖提取实验进行优化,综合考虑确定白藜芦醇最佳提取工艺为:取虎杖药材,粉碎过筛(30目)。加入8倍(mL/g)体积的78%甲醇进行回流提取,温度控制在64℃,回流提取2次。将提取液进行合并,减压浓缩回收甲醇,并得到粗提物。经过酶解之后的虎杖提取物,加入6(g∶mL)倍体积的水进行溶解,除去水溶性杂质。然后再加入乙醇调节其醇度为60%,以脱除大黄素等杂质。最后调节醇度至80%。将中性氧化铝柱安装好,中性氧化铝按照1∶12(粗提物∶中性氧化铝)的比例添加。以2BV/h的速度进样,进样完毕后以同等体积、浓度的乙醇溶液进行洗脱,以TLC方法进行跟踪检测,收集洗脱液。将洗脱液进行减压浓缩回收乙醇,并得到96.37%的白藜芦醇粗品。以50%的乙醇溶液进行溶解重结晶,结晶温度为0℃。最后进行过滤分离,冷冻干燥,得到大于98.75%白藜芦醇成品。 依据小试优化后的工艺进行中试放大。从虎杖中提取白藜芦醇和白藜芦醇苷采用甲醇溶液回流提取法。提取液经过减压浓缩回收甲醇,水解,除杂,过柱,重结晶等方法可以得到高纯度的白藜芦醇。中试最终得到产品白藜芦醇的纯度为97.80%,白藜芦醇的提取率为1.1080%。
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