摘要
植物细胞在受到逆境胁迫时会产生大量活性氧，抗坏血酸过氧化物酶就是植物体内一种清除活性氧的重要酶类。已有研究表明，通过转基因技术过表达植物抗坏血酸过氧化物酶可以提高植物抗逆性。 本实验已克隆六种毛白杨APX基因(依据基因所在染色体的不同，我们将其命名为APX-(XVI)、APX-57、APX-2-Ⅸ、APX-Ⅴ24、APX-Ⅱ、APX-Z-Ⅸ)。本文从已有的pMD18T-APX质粒克隆得到了带酶切位点的基因片段并连接在pMD18T载体上，并分别与载体pPBI121连接，构建了六个植物表达载体。 用农杆菌介导法将六个正义基因转入烟草，在卡那霉素浓度为100mg/L的MS培养基上培养烟草，获得每种基因的抗性烟草至少各70株。对抗性烟草的DNA进行PCR初步检测，对于每种基因都检测得到至少十株阳性株系，说明六种正义基因已转入烟草。对初步鉴定为阳性的转基因烟草进行southern杂交鉴定，成功鉴定APX-(XVI)、APX-Ⅴ24、APX-Ⅱ各两个株系及一个APX-57株系。部分PCR检测阳性株系仍待southern杂交鉴定，六种转基因烟草的抗旱性和抗盐性研究待进一步实验。
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