摘要
目的： 本实验采用改良的2VO法建立慢性脑缺血VD模型,观察丁香酚吸嗅后VD模型大鼠学习障碍记忆改善的情况;并使用免疫组化法检测丁香酚吸嗅后大鼠海马组织中Glu能神经元的变化情况,初步探讨其作用机制。 方法： 1.建立VD大鼠模型:用改良的2VO法造模,即先结扎右侧颈总动脉,1周后用同样的方法结扎左侧颈总动脉。 2.丁香酚对VD模型大鼠学习障碍记忆改善及机制:成年雄性SD大鼠45只随机分成3组: (1)VD模型组(n=18):用改良的2VO方法造模,①在造模完成后7d、30d、60d时,用Morris水迷宫测定大鼠的空间学习记忆能力,记录定位航行实验中大鼠到达安全平台的时间(即为逃避潜伏期)和空间探索实验中的大鼠穿越原平台的次数(即为穿台次数)为实验指标,时间都以120s为限。②在行为学实验结束后,大鼠断头取脑,制作石蜡切片,HE染色观察大鼠海马区病理形态学变化,应用免疫组化法测定大鼠海马区的Glu能神经元的变化情况。 (2)实验组(n=17):手术的操作步骤同模型组,在造模完成后3d后予以1%浓度的丁香酚吸嗅,上、下午各1次,每次30min,同时行与模型组相同的操作步骤。 (3)空白组(n=10):不做任何手术处理,余实验步骤同模型组。 结果： 1.Morris水迷宫实验中,术后7d时,模型组、实验组、空白组大鼠的逃避潜伏期、穿台次数之间差异均无统计学意义(P＞0.05)。 2.术后30d时,实验组大鼠逃避潜伏期显著短于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05);穿台次数显著多于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05)。模型组大鼠逃避潜伏期显著长于空白组,差异有统计学意义(P＜0.05);穿台次数显著少于空白组.差异有统计学意义(P＜0.05)。 3.术后60d时,实验组大鼠的逃避潜伏期显著短于模型组(P＜0.01),穿台次数显著多于模型组(P＜0.01)。模型组大鼠的逃避潜伏期显著长于空白组,差异有显著统计学意义(P＜0.01);穿台次数显著少于空白组,差异有显著统计学意义(P＜0.01)。 4.模型组大鼠在术后7d、30d和60d时,逃避潜伏期、穿台次数前后相比,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组大鼠在术后7d、30d和60d时,逃避潜伏期、穿台次数前后相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。 5.免疫组化结果中,模型组大鼠海马区Glu阳性神经元的数量较空白组大鼠显著减少(P＜0.01),实验组大鼠脑组织海马区Glu阳性神经元的数量较模型组大鼠显著增加(P＜0.01)。 结论： 1.改良的2VO法建立大鼠VD模型,对大鼠脑组织损伤较小,且会出现明显的学习记忆障碍,符合VD临床的特点。 2.在脑缺血后的60d内,随着缺血时间的延长,大鼠学习记忆障碍会越严重。 3.丁香酚吸嗅后,VD模型大鼠的学习记忆障碍可明显改善。 4.丁香酚改善VD模型大鼠的学习记忆能力与抑制海马区Glu能神经元的下降有关。
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