摘要
目的： 研究弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。 材料与方法： 菌株来源 收集安徽医科大学第一附属医院2010年1月～2011年10月间住院和门诊送检标本61株(剔除重复株)。标本种类分布:痰液39份、分泌物14份、尿液8份。全部菌株均使用WalKAway-96细菌鉴定仪鉴定为弗劳地枸橼酸杆菌。质控菌包括大肠埃希菌ATCC25922、K.pneumoniae ATCC BAA-1705、K.pneumoniae ATCC BAA-1706(均为安徽医科大学第一附属医院检验科保存)。利福平耐药的大肠埃希菌EC600用于接合试验的受体菌。 方法 参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)[28]用琼脂稀释法检测61株弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南以及其他常见药物的最低抑菌浓度(MIC)。改良Hodge试验对61株弗劳地枸橼酸杆菌进行耐药表型检测,等电聚集电泳分析其β-内酰胺酶类型,聚合酶链反应(PCR)和DNA序列分析检测β-内酰胺酶基因型,接合试验分析其耐药质粒传递情况。 结果： 只有一株碳青霉烯类抗生素耐药的弗劳地枸橼酸杆菌改良 Hodge试验结果为阳性,该株弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的 MIC均为64μg/ml、对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南和氨基糖甙类均耐药。转移接合试验结果显示弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药性可以通过质粒转移。等点聚焦电泳结果显示弗劳地枸橼酸杆菌具有约pI5.2、6.0、6.7、8.0的4种β-内酰胺酶,接合子有约 pI6.7的β-内酰胺酶,PCR检测及序列分析结果显示该菌产生KPC-2基因。 结论： KPC-2型碳青霉烯酶的产生可能是引起弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,并且该耐药性基因能通过质粒进行转移。
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