摘要
研究背景与目的: 阳春砂Amomum villosum Lour.为姜科豆蔻属植物，其干燥成熟果实作砂仁药用，为我国著名的“四大南药”之一，具化湿开胃、温脾止泻、理气安胎的功效，在其道地产区广东省阳春市具有悠久的栽培历史。 阳春砂种子具生命力短、不易萌发且萌发率较低的特性，生产上采用种子育苗时多采用“随采随播”的方式，不利于实生种苗的大量繁育。但由于其分株能力强，且分株苗开花结实早，砂仁药材实际生产中通常历采用分株繁殖的方法。但长期的无性繁殖易造成其种性退化、病虫害发生率高、药材品质下降。此外，即便是道地产区所产的砂仁，由于不同居群生境特征的差异性和采收时期的不一致，种子质量亦存在参差不齐的现象。因此，摸清阳春砂种子的特性，开展实生种苗的繁育技术，有利于其药材生产的发展。 方法: 1.参照《农作物种子检验》方法，对阳春砂种子的品质检验（真实性、千粒重、含水量、生活力、发芽率）进行方法学研究;并采用体视镜，观察记录阳春砂种子破萌与萌发过程的胚率的变化。 2.依照优选出的各项指标检测的测定方法。具体如下:采用五百粒法测定种子千粒重，低恒温烘干法(烘5h)测定种子水分;采用四唑染色法(TTC)测定，染色温度30℃，TTC浓度选择0.4％，染色时间选择12h。发芽试验采用赤霉素低温浸种后，置于底部铺有2层湿润纱布培养皿中，于26℃下光照培养，每个处理设置4组，每组100粒。对16个不同居群的阳春砂种子进行品质检测，并采用K聚类分析方法进行种子质量分级标准的制订。 3.随机选取萌发0d、10d、20d、30d、35d、40d的阳春砂种子，采用体视镜，观察记录胚率的变化;并分别采用葸酮比色法、考马斯亮蓝G-250法和油重法，测定样品中可溶性多糖、可溶性蛋白和粗脂肪的含量，分析种子破眠与萌发过程的物质代谢情况;采用HPLC法测定阳春砂种子萌发过程中内源激素(GA3、IAA、ABA)的含量。色谱条件，流动相:A-甲醇，B-乙腈，C-磷酸缓冲液(pH3.3);流速为1 mL/min;梯度洗脱:0 min，20％A:0％B:80％C;0～50 min，25％A:15％B:60％C;柱温35℃;进样量:10μL;检测波长:双波长，210 nm(GA3)和260 nm(IAA、ABA)。 结果: 1.阳春砂种子品质检验的方法:千粒重的测定以五百粒法为宜;水分含量测定以低恒温法为宜;生活力测定则采用TTC法，以0.4％四唑溶液，30℃温度下染色12h;种子引发处理，则采用浓硫酸浸泡、赤霉素低温浸种;芽床宜选砂及纱布;发芽温度，以25℃或20-28℃变温为宜。 2.16个不同居群阳春砂种子的千粒重为6.808～19.120 g;含水量为11.46％～19.20％;新鲜自然干燥的种子生活力为82.00～95.03％，4℃贮藏72d后，种子生活力为51.33～79.67％;低温激素浸种的发芽率高于常温激素浸种(p＜0.01);4℃贮藏的阳春砂种子发芽率呈现先升后降的趋势，发芽率范围为30～60％。初步将阳春砂种子质量分为三级，Ⅰ级种子发芽率≥45.78、千粒重≥15.672、生活力≥65.75、水分≤11.18，二级种子发芽率≥20.44、千粒重≥14.278、生活力≥64.00、水分≤11.35，三级种子发芽率≥10.00、千粒重≥6.808、水分≤13.87。 3.种子破眠与萌发过程营养物质与激素含量的动态变化:未经引发处理的阳春砂种子胚率为32.81％，引发处理后阳春砂种子的胚率呈不断上升趋势，前期缓慢上升，15～25 d上升明显，有胚芽、胚轴、胚根的形成。在0～10d可溶性多糖含量逐渐上升且达2.55 mg/g，10～35 d含量持续下降，35～40 d含量趋于平衡;可溶性蛋白含量在0～10d出现缓慢上升并达到峰值2.16 mg/g，10～30 d含量缓慢下降，在30～35 d又上升趋势;并在35～40 d下降;粗脂肪含量在0～45 d持续下降，含量从28.7 mg/g下降至9.7 mg/g。经过低温激素浸种后的种子，IAA初期含量较低，为503.15 ng/g,而ABA含量3539.24 ng/g，10～20 d后，GA3、IAA含量递增，ABA含量逐渐减少。三者之间比值GA3/ABA，IAA/ABA在萌发的0～20 d比较稳定，后续20～40 d出现曲线上升。 结论: 不同居群阳春砂种子成熟度不一致，种子品质退化较严重，种子发芽率普遍不高。不同居群阳春种子的品质存在较为明显的差异。根据16个居群的品质检验结果初步可将阳春砂种子质量分为三级。低温激素浸种可打破种子的休眠与促进种子的萌发;种子萌发过程中胚率呈逐步上升趋势，其内在营养物质代谢与内源激素的含量变化均呈一定和变化趋势。
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