摘要
本论文采用水煮、醇沉的方法，得到蝙蝠蛾拟青霉粗多糖CPHP，CPHP经冻融分级、酶-Sevag法联合脱蛋白、Sepharose CL—6B柱层析和HPLC制备等方法进行纯化，得到PHP，PHP经HPLC分析，为均一组分多糖，分子量为28kDa。 GC分析表明，PHP主要由 Man、Gal、Glc和Rha四种单糖组成，其摩尔比为13.36∶8.18∶3.59∶1。PHP经部分酸水解反应发现，PHP的主链由 Man和Gal两种单糖组成，糖链末端或支链主要由Glc、Gal和少量Rha组成。高碘酸氧化及Smith降解结果表明，1→、1→6键型是PHP的主要连接键型，同时还存在1→、1→2、1→2，6、1→4、1→4，6键型。 PHP甲基化分析结果表明，PHP中共存在6种键型，其中Man检出1→2、1→2，6两种键型;Gal检出1→和1→6两种键型;Glc检出1→6键型;Rha检出1→2键型，除 Rha外，检出的键型都能被高碘酸氧化，与高碘酸氧化结果一致。经计算，四种单糖的摩尔比为Man∶Gal∶Glc∶Rha=15.26∶9.10∶3.63∶1，与气相色谱结果基本一致。 CPHP对淋巴细胞的增殖及转化的影响结果表明，CPHP在100-400μg/ml浓度下，均能促进淋巴细胞的增殖，并且随着浓度的增加，促进作用越明显;在100-200μg/ml时，CPHP可以促进ConA诱导的T淋巴细胞的增殖，而对LPS诱导的B淋巴细胞的增殖无明显影响。 CPHP对S180肉瘤的抑制作用结果:PHP在50、100、200mg/kg浓度下的抑瘤率分别为0.32±0.15、0.44±0.18、0.34±0.24，而环磷酰胺阳性组的抑瘤率为0.75±0.10，该结果表明，PHP对S180肉瘤具有抑制作用，但抑制作用不如阳性药物环磷酰胺;与此同时，100mg/kgCPHP给药组小鼠的脾指数显著高于阴性对照组（p＜0.05），而CPHP给药组小鼠的胸腺指数显著低于生理盐水组;ELISA法检测血清中TNF-α水平结果表明，与阴性对照相比，CPHP在100mg/kg和200mg/kg给药后，荷瘤小鼠血清中的TNF-α水平明显增加，并且随着给药浓度的增加，血清中TNF-α水平越高。说明CPHP可以促进S180荷瘤小鼠TNF-α的生成。
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