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紫苏离体再生体系的建立及其遗传转化初步研究

刘培培

紫苏离体再生体系的建立及其遗传转化初步研究

刘培培1
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作者信息

  • 1. 中北大学
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摘要

本研究以紫苏的子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,建立了紫苏的离体再生体系,获得了正常的再生植株。本实验运用对比试验的方法,研究了影响紫苏再生的因素,同时对紫苏的遗传转化体系进行了初步探索。其实验结果表明: 1、紫苏子叶的最佳分化培养基为MS+BA1.0mg/L+IAA1.5 mg/L,再生率最高80.0%,平均每外植体长芽2.3个,下胚轴的最佳分化培养基为MS+BA3.0mg/L+NAA0.3 mg/L,再生率为70.9%,平均每外植体长芽2.5个。再生芽的生根培养基为1/2MS+1.0mg/L BA+0.3mg/L IAA,生根率达到100%,移栽成活率在85%以上。 2、以11天苗龄的紫苏苗作为实验材料,白砂糖添加30g/L,2,4-D预培养后转入最佳分化培养基,子叶暗培养12天,下胚轴暗培养8天后,给予每天14h光照处理,可以较大幅度提高紫苏外植体的再生率。培养基中添加4mg/L AgNO3的处理可使子叶外植体再生频率提高5.4%,下胚轴外植体的再生频率提高9.4%。 3、遗传转化研究表明,下胚轴抗性芽的筛选压力为40mg/L Kan,转化苗生根的筛选压力为35mg/L Kan,研究发现培养基中添加15mg/L Kan时,每外植体长芽7.6个,为对照组的3.3倍,较大地提高了每个外植体的再生芽数。农杆菌侵染后,选用羧苄青霉素作为抑菌剂,将外植体与农杆菌共培养2天,转接到附加羧苄青霉素400mg/L的培养基上进行抑菌处理,抑菌效果效果最好。

关键词

紫苏/离体再生体系/遗传转化/抑菌处理

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授予学位

硕士

学科专业

生物化工

导师

李会珍

学位年度

2011

学位授予单位

中北大学

语种

中文

中图分类号

S6
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