摘要
目的:本文以银合欢叶为研究对象,对其进行生药学鉴定,体外抗肿瘤活性研究及化学成分研究,为深入研究银合欢叶及进一步开发利用提供科学依据。 方法:本文采用性状鉴别法和显微鉴别法对银合欢叶进行生药学鉴定。银合欢叶采用95%乙醇加热回流提取得到乙醇总提取物,用系统溶剂法分得不同极性溶剂的石油醚部位、乙酸乙酯部位和水饱和正丁醇部位的提取物。采用MTT法研究银合欢叶不同提取物在24h、48h、72h对人胃癌细胞株SGC7901和人肝癌细胞株BEL7404的抑制情况,并确定其抗肿瘤活性部位。采用硅胶柱色谱法、聚酰胺柱色谱法和重结晶法等现代分离方法和技术对乙酸乙酯部位提取物进行化学成分的分离纯化,采用理化检验、UV、IR、1H-NMR、13C-NMR和MS等方法对化合物进行结构鉴定。 结果:描述了银合欢叶叶柄和小叶片各自的性状和显微特征。银合欢叶不同部位提取物对人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株BEL7404表现出不同的抑制作用:在高浓度时,银合欢叶正丁醇部位提取物对人肝癌细胞株BEL7404,在24h、48h和72h时的抑制率分别为:3.72%、29.31%和4.21%。银合欢叶乙酸乙酯部位提取物对胃癌细胞株SGC7901,在24h、48h和72h时的抑制率分别为:0.91%、19.78%和11.65%;对人肝癌细胞株BEL7404的抑制率分别为:9.17%、14.86%和11.88%。银合欢叶石油醚部位提取物对胃癌细胞株SGC7901,在24h、48h和72h时的抑制率分别为:3.04%、19.88%和16.97%;对人肝癌细胞株BEL7404的抑制率分别为:22.28%、9.73%和3.85%。从银合欢叶乙酸乙酯部位提取物中分离得到6个化合物,鉴定了5个化合物的结构,分别为:三十一烷醇(hentriacontanolⅠ)、十八烷酸(octadecylic acidⅡ)、β-谷甾醇(β-sitosterolⅢ)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(quercetin-3-O-α-L-rhamnoseⅤ)和胡萝卜苷(daucosterolⅥ)。 结论:生药学特征为银合欢叶的生药鉴定、开发药材新资源提供了鉴别参考依据。在3个时间段中,银合欢叶正丁醇部位提取物对胃癌细胞株SGC7901无抑制作用,对人肝癌细胞株BEL7404在48h时抑制作用最强;银合欢叶乙酸乙酯部位提取物对胃癌细胞株SGC7901和人肝癌细胞株BEL7404均在48h时抑制作用最强;银合欢叶石油醚部位提取物对胃癌细胞株SGC7901在48h时抑制作用最强,对人肝癌细胞株BEL7404均在24h时抑制作用最强;银合欢叶提取物对胃癌细胞株SGC7901和人肝癌细胞株BEL7404凋亡作用,随药物浓度的增加,抑制作用越明显。从银合欢叶中共分离鉴定出5个化合物,其中三十一烷醇(hentriacontanolⅠ)、十八烷酸(octadecylic acidⅡ)、β-谷甾醇(β-sitosterolⅢ)和胡萝卜苷(daucosterolⅥ)4个化合物为首次从该植物中得到。