摘要
目的：以生物药剂学及药动学观点研究补肺活血胶囊中补骨脂的物质基础。以物质基础中主要成分为指标,优化补骨脂提取、纯化工艺,建立提取物质量标准草案。为深度开发补肺活血胶囊奠定基础。 方法：补骨脂提取物的指纹图谱采用HPLC法进行研究。采用大鼠在体单向灌流模型,研究灌流液中补骨脂提取物主要成分减少情况,以及各成分入血情况。采用大鼠体内模型,研究灌胃给药后入血成分、尿液排泄成分以及粪便排泄成分。结合以上两种模型,比较分析补骨脂提取物被吸收成分,确定其为补骨脂的物质基础。以物质基础为指标,采用正交试验设计,优化补骨脂提取工艺。确定补骨脂提取物富集纯化工艺。根据新药开发的一般要求制定提取物的质量标准。 结果：采用Kromasil C18 (250x4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水相(含0.1%甲酸、10mmol·L-1乙酸铵),梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长为245nm、320nm。补骨脂各成分在该色谱条件下得到较好的分离,精密度和稳定性试验结果良好。肠灌流试验中,补骨脂提取物的4种主要成分都有不同程度吸收。灌胃给药后,SD大鼠血样、尿样中也检测到这4种成分,粪样中这些成分较灌胃提取物相对减少。经结构确证,这4种成分分别为补骨脂素苯并呋喃苷、异补骨脂素苯并呋喃苷、补骨脂素、异补骨脂素。它们是补肺活血胶囊中补骨脂发挥药效的物质基础,并以此作为优化提取纯化工艺的指标成分。优选的补骨脂提取工艺为:补骨脂药材依次用8倍量、7倍量60%乙醇回流提取两次,每次1.5h。优选的纯化工艺为:以D101大孔吸附树脂为填料,上样液浓度为0.5g生药·mL-1,上样量为1BV,吸附流速为1~2mL·min-1。吸附平衡2h后,解吸附阶段用3BV纯水除杂,7BV70%乙醇洗脱目标成分,收集洗脱液,回收乙醇,干燥得粉末。质量标准研究主要针对性状、鉴别、指标成分含量测定、检查等方面进行研究,制定了补骨脂提取物的质量标准草案。 结论：初步明确了补肺活血胶囊中补骨脂的物质基础,并优化了提取、纯化工艺,制定了补骨脂提取物的质量标准草案,为补肺活血胶囊的深度开发奠定了基础。
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