摘要
目的:本研究以胃癌组织和胃癌细胞系为实验材料，探讨14-3-3β蛋白与胃癌淋巴结转移的关系，深入研究14-3-3β蛋白通过Erk1/2信号传导通路促进淋巴结转移的机制。 方法:本研究采用6种胃癌细胞系(MGC-803，BGC-823，SGC-7901，HGC-27，NCI-N87，KATO(Ⅲ))，通过Western Blot的方法检测14-3-3β蛋白和Erk1/2信号传导通路相关蛋白(Raf、P-Raf、 Erk1/2、P-Erk1/2)的表达情况;通过siRNA技术干扰14-3-3β蛋白高表达细胞，采用RT-PCR检测YWHAB基因的表达，Western Blot检测Erk1/2信号传导通路蛋白的表达，CCK-8检测胃癌细胞的增殖能力;临床收集172例胃癌组织标本，利用免疫组织化学技术检测14-3-3β蛋白与Erk1/2信号通路磷酸化蛋白(P-Raf、 P-Mek、P-Erk1/2)的表达情况，明确其表达与淋巴结转移的关系。 结果:通过检测14-3-3β蛋白和Raf、 P-Raf、Erk1/2、P-Erk1/2蛋白在6种胃癌细胞系中的表达情况，筛选出相关蛋白高表达细胞系MGC-803、SGC-7901。在这两种细胞系中，通过siRNA干扰可有效降低YWHAB基因的表达水平，同时下调了14-3-3β蛋白的表达，进而抑制Erk1/2蛋白的磷酸化水平;采用CCK-8检测细胞的增殖能力，研究结果表明，siRNA干扰组与control组相比较，细胞增值能力显著降低(P＜0.01)。 采用免疫组化的方法对172例胃癌组织标本进行检测，结果表明，根据14-3-3β蛋白的表达情况分为低表达组64例(37.21％)，高表达组108例(62.79％);根据淋巴结转移情况分为淋巴结转移阴性组55例(31.98％)，淋巴结转移阳性组117例(68.02％)。14-3-3β蛋白高表达时，淋巴结阳性转移81例(75.00％)显著高于阴性淋巴结转移27例(25.00％)。根据淋巴结阳性转移个数分为N1(1-2)组;N2(3-6)组;N3(≥7)组，分析结果显示，在胃癌组织中14-3-3β蛋白表达水平和淋巴结转移数目呈正相关，各组间有统计学意义(P＜0.05);14-3-3β蛋白表达与P-Raf、 P-Mek、P-Erk1/2蛋白表达显著相关(P＜0.05)。 结论:14-3-3β蛋白能够促进胃癌细胞增殖，降低14-3-3β蛋白表达可明显下调Erk1/2磷酸化蛋白表达，14-3-3β蛋白可能通过Erk1/2信号传导通路参与胃癌淋巴结转移，并且与淋巴结转移数量相关。
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