摘要
目的：肝癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率位居世界第五位，死亡率仅次于肺癌和结肠癌。高良姜素是一种存在于药食两用植物高良姜的根茎中的天然黄酮类化合物，具有抗肿瘤活性。本实验通过观察高良姜素处理后的HepG2细胞增殖情况、内质网应激相关蛋白表达变化情况和自噬相关蛋白表达情况，来探讨高良姜素促进HepG2细胞自噬的途径是否与内质网应激有关，为高良姜素应用于肝癌的治疗提供理论基础。 方法：①采用MTT法检测细胞的增殖情况。②显微镜观察细胞形态变化情况。③通过Western blot检测内质网应激相关蛋白GRP94、GRP78、CHOP以及自噬相关蛋白LC3表达量的变化情况。④用内质网应激抑制剂4-PBA预处理HepG2细胞30min后或用CHOPsiRNA转染HepG2细胞24h后，再用35μg/ml的高良姜素处理细胞24h。⑤采用MTT法检测细胞的增殖情况。⑥通过Western blot检测GRP94、GRP78、CHOP表达量的变化情况。⑦采用MTT法检测细胞的增殖情况。⑧通过Western blot分别检测ERK、pERK、JNK、pJNK、p38MAPK、pp38MAPK、 GRP94、GRP78、CHOP表达量的变化情况。 结果：实验结果显示:高良姜素可以抑制HepG2细胞的增殖;高良姜素可以促进内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、GRP94的表达;高良姜素可以使细胞内钙离子浓度增加;当抑制或下调CHOP表达时，高良姜素对HepG2细胞增殖的抑制作用减弱;高良姜素可以激活MAPKs家族成员的表达，MAPKs抑制剂使高良姜素对CHOP、GRP78、GRP94的表达下调。 结论：⑴高良姜素诱导HepG2细胞内质网应激、促进细胞自噬、抑制细胞增殖。⑵高良姜素能激活MAPKs家族。⑶MAPKs家族在高良姜素诱导的内质网应激中起关键作用。
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