摘要
目的: 本实验中主要探讨瑞舒伐他汀、氯沙坦两药联合对OX-LDL诱导的人单核-巨噬细胞肝X受体基因表达的影响及可能的机制。 方法: 采用体外密度梯度离心法分离并培养单核细胞，传至第3代，以佛波脂(120nmol/L)将单核细胞转化为巨噬细胞，培养48小时后用于实验。据实验要求设置空白对照组、OX-LDL模型对照组(OX-LDL50ug/ml诱导后单独培养48h)、氯沙坦组(加入OX-LDL50ug/ml培养2h，在此基础上分别加入氯沙坦10 umol/l，50 umol/l，100 umol/l孵育48h)、瑞舒伐他汀组（加入OX-LDL50ug/ml培养2h，在此基础上分别加入瑞舒伐他汀0.1umol/l，1.0umol/l，5umol/l孵育48h)、瑞舒伐他汀联合氯沙坦组（加入OX-LDL50ug/ml培养2h，在此基础上加入最适剂量瑞舒伐他汀联合最适剂量氯沙坦5+100 umol/l共同作用48h），分别提取各组细胞RNA，用RT-PCR法测定肝X受体的mRNA的表达，Westernblotting法测定肝X受体蛋白表达水平。 结果: 1.人静脉血经分离后培养出的悬浮单核细胞，再经佛波酯诱导后，成功转化为不规则多边形贴壁生长的巨噬细胞见图1、2，流式细胞术鉴定90％以上单核细胞已转化为巨噬细胞。 2.油红O染色结果显示:镜下观察细胞形态饱满，边界清晰，排列紧密，可见胞质内被染为橙红色的脂滴。见图3、4。 3.巨噬细胞肝X受体mRNA的变化:与空白对照组比较，OX-LDL诱导的模型对照组LXRmRNA表达水平明显降低(P＜0.05);氯沙坦组与OX-LDL模型对照组比较，LXRmRNA表达水平显著增高(P＜0.05);瑞舒伐他汀组与OX-LDL模型对照组比较，LXRmRNA水平显著增高(P＜0.05);瑞舒伐他汀联合氯沙坦组与OX-LDL模型对照组比较，LXRmRNA水平显著增高(P＜0.05)，并且高于单药组(P＜0.05)。 4.巨噬细胞肝X受体蛋白表达的变化:OX-LDL模型对照组的肝X受体在蛋白水平上较空白对照组明显降低(P＜0.05);氯沙坦组与OX-LDL模型对照组比较，肝X受体蛋白表达水平显著增高(P＜0.05);瑞舒伐他汀组与OX-LDL模型对照组比较，肝X受体蛋白表达水平显著增高(P＜0.05);瑞舒伐他汀联合氯沙坦组与OX-LDL模型对照组比较，肝X受体蛋白表达水平显著增高(P＜0.05)，并且高于单药组(P＜0.05)。 结论： 瑞舒伐他汀、氯沙坦均可上调LXR的表达从而增强胆固醇外流，而瑞舒伐他汀与氯沙坦以适宜剂量联合后，LXR的表达增高比单独用药更为显著。
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