摘要
取健康成年母貂肠道及粪便,经过选择培养基进行筛选,水貂肠道内筛选出的主要优势菌为乳酸菌类、肠杆菌类、芽孢杆菌类、酵母菌类、肠球菌类等。 结合我国农业部规定的饲喂微生物的限制规定,选择乳酸菌、芽孢杆菌和酵母菌三种有益菌进行分离鉴定。乳酸菌初步鉴定为乳酸杆菌属(Lactobacillus)命名为RSJ;分离鉴定酵母菌两株(分别命名为JM1和JM2),JM1菌株被鉴定为Pichia fabianii strain;JM2菌株被鉴定为酿酒酵母。分离到芽孢杆菌命名为P2,被鉴定为枯草芽孢杆菌。 对分离的菌种进行生物特性研究,包括生长试验、耐酸试验、抑菌试验以及药敏试验等。乳酸菌菌株RSJ:在前22 h菌株繁殖较快,22-36 h菌株维持在稳定期;对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有一定的抑菌作用;对青霉素、庆大霉素和环丙沙星等有一定的耐药性;安全性试验显示小鼠生长状况良好,无死亡现象,说明菌株RSJ对小鼠无毒性。酵母菌菌株JM1和JM2的两菌株均在8-30h生长较快,在30-40h生长趋于平稳;经过14 d的灌服观察,无死亡现象,两个菌株对小鼠均无毒性。枯草芽孢杆菌菌株P2在前16h菌株繁殖较快,18-30 h菌株维持在稳定期;对阿莫西林、环丙沙星和多粘菌素等有一定的耐药性;且对小鼠无毒性。 对分离筛选的益生菌进行复合搭配,并对复合菌种的安全性和热稳定性等进行研究。安全试验结果表明:复合菌种对小鼠采食、精神均无影响,未出现中毒现象和死亡情况等;尸体剖检与对照组相比未见异常;对雄性和雌性小鼠的增重均高于对照组,尤其是饲喂15d后雄性小鼠生长最快。热稳定试验表明:乳酸杆菌和酵母菌对热较敏感,而枯草芽孢杆菌对热不敏感。 在上述研究的基础上,进行了水貂饲喂试验。经过临床本动物试验证实,饲喂益生菌的水貂精神状态良好、粪便正常、没有发生腹泻的和死亡的;体重明显增加。分离鉴定的三种菌可以作为益生菌菌种为今后益生菌制剂的研究奠定基础。