桃红四物汤对大鼠脑缺血再灌注损伤大脑皮质神经元的治疗作用研究

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中文摘要：目的: 大量最新研究成果表明细胞凋亡在脑缺血再灌注损伤中起到重要作用，其中Caspase-3、p53已被证实与神经元凋亡关系密切。临床运用桃红四物汤加减治疗缺血性脑血管疾病疗效显著，然而桃红四物汤抑制脑缺血再灌注损伤大脑皮质神经元凋亡的机制仍不十分清楚。为此，本研究通过给予大脑中动脉阻塞再灌注模型大鼠不同剂量的桃红四物汤，拟揭示桃红四物汤可通过抑制大鼠大脑皮质Caspase-3、p53的表达减少神经元凋亡，对脑缺血再灌注损伤具有治疗作用。方法: 将120只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组（大脑中动脉阻塞再灌注组）、桃红四物汤低剂量组(0.7g/kg)、中剂量组(1.4g/kg)、高剂量组(2.1g/kg)共6组，每组20只。采用进一步改良后的新式线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型。缺血90分钟再灌注24小时后，参照Garcia神经功能评分标准，评价各组大鼠的神经行为学功能，满分为18分。6-12分者，为造模成功。24小时后，桃红四物汤低、中、高剂量组分别以桃红四物汤低、中、高剂量连续7天灌胃治疗，每日一次;模型组、假手术组和正常组正常喂养。到第8天时，对各实验组大鼠进行神经功能评分并处死取脑;进行TTC染色，使用Image-Pro-Plus软件测量各组大鼠脑梗死体积率;通过Nissl染色法显示神经元形态;TUNEL法显示凋亡神经元形态;免疫组织化学法测定Caspase-3、p53的表达情况;采用SPSS19.0统计软件进行统计分析。结果: 1、神经功能评分结果:正常组及假手术组大鼠神经功能评分均为18分(P＞0.01);模型组神经功能评分较正常组及假手术组明显降低(P＜0.01);桃红四物汤低、中、高剂量组的神经功能评分均较模型组明显增加，且神经功能评分随桃红四物汤给药剂量的增加而增加(P＜0.01)。 2、TTC染色结果:正常组及假手术组大鼠大脑皮质均匀红染无梗死灶形成，相比之下，模型组大鼠大脑皮质有大量苍白梗死灶形成(P＜0.01)，桃红四物汤低、中、高剂量组的梗死灶范围均较模型组明显减少(P＜0.01)，梗死灶范围随给药剂量的增加而减少（P＜0.05）。 3、Nissl染色结果:正常组与假手术组大鼠缺血再灌注区脑皮质神经元数量无明显差异（P＞0.01）;与正常组及假手术组大鼠相比，模型组大鼠大脑皮质正常神经元数量明显减少（P＜0.01）;桃红四物汤低、中、高剂量组大鼠大脑皮质正常神经元数量均较模型组明显增加，并随给药剂量增加而增加（P＜0.01）。 4、TUNEL染色法结果:正常组与假手术组大鼠缺血再灌注区大脑皮质神经元凋亡数量无明显差异(P＞0.01);与正常组及假手术组大鼠相比，模型组大鼠大脑皮质神经元凋亡数量显著增加(P＜0.01);桃红四物汤低、中、高剂量组大鼠的大脑皮质神经元凋亡数量较模型组明显减少，并随给药剂量增加而减少(P＜0.01)。 5、免疫组织化学染色法结果:正常组与假手术组大鼠缺血再灌注区大脑皮质神经元Caspase-3、p53的阳性表达无明显差异(P＞0.01);与正常组及假手术组大鼠相比，模型组大鼠大脑皮质区神经元Caspase-3、p53的阳性表达显著增加(P＜0.01);桃红四物汤低、中、高剂量组大鼠的大脑皮质神经元Caspase-3、p53的阳性表达较模型组明显减弱，并随剂量增加而减弱(P＜0.01)。结论: 桃红四物汤低、中、高剂量组均可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的大脑神经功能，减少其脑梗死体积率，降低大鼠大脑皮质神经元的死亡和凋亡数量，从而对大脑皮质的神经元具有治疗作用，并且其治疗效果桃红四物汤随给药剂量的增加而增强，这可能与抑制Caspase-3、p53的表达有关。

作者：

范瑞娟

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关键词：

桃红四物汤脑缺血再灌注大脑皮质治疗作用动物模型

授予学位：

硕士

学科专业：

中医基础理论

导师：

罗亚非

学位年度：

2014

学位授予单位：

贵阳中医学院

语种：

中文

中图分类号：