摘要
马梨形虫病是通过媒介蜱传播的一种马属动物血液原虫病，现已报道该病的病原主要有两种，分别是马泰勒虫（Theileia equi，旧称马巴贝斯虫Babesia equi）和马驽巴贝斯虫（Babesia caballi），世界动物卫生组织（OIE）将该病列入动物疫病名录，属法定报告疫病，在我国被列为二类动物疫病。马泰勒虫病的发生比驽巴贝斯虫病更为严重和广泛。目前马泰勒虫病在全球多个国家和地区均有发生，如未能进行及时诊断和治疗，可对养马业造成重大损失。目前，世界各国虽然在马泰勒虫病诊断方法方面开展了大量研究，为防控马泰勒虫病奠定了基础，但可直接用于临床诊断、尤其是早期诊断的技术方法较少，因此很有必要开展这方面的研究工作。 (i)本实验研究，根据GenBank中登录的T.equi18S rRNA保守序列设计一对特异性引物和TaqMan探针，经过反应体系及条件优化，建立了T.equi荧光定量检测方法。结果显示，该方法的灵敏度可达1×101拷贝/μL，比普通PCR灵敏度高1，000倍;该方法可特异地检测T.equi，对马驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、牛环形泰勒虫均无反应;组内及组间重复试验变异系数均小于3％。用建立的荧光定量PCR和常规PCR分别对50份临床样品进行检测，荧光定量PCR的阳性检出率为40％，常规PCR的阳性检出率仅为34％。该方法的建立可为马泰勒虫病的敏感、特异、快速的早期诊断提供技术支撑。 (ii)本文分别采用血液涂片染色镜检法和荧光定量PCR方法对906份采自于伊犁河谷周边马群的部分马全血，进行了马泰勒虫病的分子流行病学调查。结果显示，使用荧光定量PCR检出的阳性(34.44％)明显高于血液涂片染色镜检(20％)。采用统计学方法对检测结果按不同牧场、年龄、放牧季节进行对比分析，结果发现不同区域马泰勒虫病感染率差异显著(P＜0.05)，不同季节感染情况差异显著(P＜0.05)，不同年龄感染情况差异不显著(P＞0.05)。本文建立的荧光PCR检测方法首次开展该类试验研究和分子流行病学调查等，可为伊犁马蜱传血液原虫的防控提供技术支持。
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