摘要
本研究通过大田放养、花粉饲喂、稻杆粉作用3种方式，以成年泥鳅机体Cry1Ab/Ac蛋白含量、生长发育、生理酶活性、血常规与红细胞核及组织学为试验指标，以非转基因亲本水稻明恢63（MH63）为对照，评价了转Cry1Ab/Ac抗虫水稻华恢1号（HH1）对泥鳅的安全性影响。试验取得了以下研究结果： 一、转Cry1Ab/Ac抗虫水稻及泥鳅不同器官中的毒蛋白含量 采用双抗体夹心ELISA方法，选用 EnvirLogix公司Cry1Ab/Ac试剂盒，分别检测不同生长期的水稻。结果表明 HH1水稻不同器官（根、茎、叶、花、种子）良好的表达了Cry1Ab/Ac蛋白，在生长周期中呈现为成熟期＞扬花期＞拔节期。 水稻拔节、扬花和成熟时，HH1水稻田间泥鳅的鳃、肠、胃、肌肉和性腺中Cry1Ab/Ac蛋白含量均低于最低检测值0.2ng/g。 二、转Cry1Ab/Ac抗虫水稻对泥鳅生长性能的影响 通过鲜重称量，结合生物参数计算公式，统计结果显示，2012年HH1稻田环境对泥鳅的增重率、肥满度、内脏系数、肝体比和成熟系数没有影响（P>0.05）。2013年于HH1水稻拔节期、扬花期、成熟期时，泥鳅的增重率、肥满度、内脏系数、肝体比、成熟系数与同期对照没有显著性差异（P>0.05）。 饲料中添加1%、5%、10%、20%、40%HH1花粉后，与同一水平对照组相比，泥鳅的增重率、肥满度、内脏系数、肝体比、肾体比和成熟系数没有明显变化（P>0.05）。 不同（10、50、100、200 mg/L）浓度 HH1稻杆粉对泥鳅的增重率、肥满度、内脏系数、肝体比和成熟系数均没有影响（P>0.05）。 三、转Cry1Ab/Ac抗虫水稻对泥鳅生理酶活性的影响 结合邻苯三酚自氧化法、紫外分光光度法、CDNB比色法、福林酚法、Ellman法分别检测了泥鳅的SOD、CAT、GST、蛋白酶和AChE活性。结果表明，2012年HH1试验田泥鳅的肝脏SOD、CAT、GST活性与对照无显著性差异（P>0.05）。2013年不同生长期的HH1水稻对泥鳅肝脏、肾脏、鳃的SOD、CAT、GST活性均无显著影响（P>0.05）。HH1稻田中泥鳅的胃、前肠、中肠、后肠蛋白水解酶活性与对照无明显差异（P>0.05）。泥鳅脑、肝脏、肌肉的AChE活性没有受到HH1水稻的影响（P>0.05）。 泥鳅取食1~40%HH1花粉饲料后，其肝脏的SOD、CAT、GST活性与对照相比无明显变化（P>0.05）；胃、肠的蛋白水解酶活性与对照无显著性差异（P>0.05）；脑、肝脏、肌肉的AChE活性未受HH1花粉影响（P>0.05）。 经10~200mg/L HH1稻杆粉处理后，泥鳅肝脏、肾脏的SOD、CAT、GST活性，胃、肠的蛋白水解酶活性，脑、肝脏、肌肉的AChE活性均与对照无显著性差异（P>0.05）。 四、转Cry1Ab/Ac抗虫水稻对泥鳅血常规及红细胞核的影响 应用南京建成高铁血红蛋白试剂盒及血涂片法，对泥鳅的血液进行研究。结果表明，2012年HH1稻田环境对泥鳅的Hb、MHb含量及红细胞核没有明显负作用（P>0.05）。2013年HH1稻田中泥鳅的红细胞微核率、核异常率、总核异常率、核外凸率、核不等缢裂率与对照无显著性差异（P>0.05）。 取食1~40%HH1花粉饲料后，泥鳅的Hb、MHb含量与同一水平对照相比无明显变化（P>0.05）。分别统计10%、20%、40%花粉处理组泥鳅的红细胞，结果显示，10~40%HH1组泥鳅的微核率、核异常率、核外凸率、核不等缢裂率均与对照无显著性差异（P>0.05）。 10~200mg/LHH1稻杆粉对泥鳅的Hb、MHb没有显著影响（P>0.05）。计数高浓度（200mg/L）组泥鳅红细胞，结果表明，HH1组泥鳅微核率、核异常率、核外凸率、核不均等分裂率均与对照无明显差异（P>0.05）。 五、转Cry1Ab/Ac抗虫水稻对泥鳅性腺组织的影响 采用石蜡切片法，观察了2012年HH1、MH63水稻成熟时，田间泥鳅卵巢、精巢的组织结构。显微结果显示，HH1水稻环境中泥鳅卵巢、精巢发育程度与对照一致，且二者泥鳅性腺的结构均无明显差异。
NETL