摘要
目的：研究接尘观察对象、壹期、贰期、叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞中自噬活动的变化情况，探讨自噬活动与煤矿粉尘所致肺部纤维化病变之间关系，并阐述其可能的调节机制。 方法：选取在中国煤矿工人北戴河疗养院进行大容量全肺灌洗，经尘肺诊断专家组确诊患有煤工尘肺的患者116例，并排除患有肺部相关的疾病（如肺炎，肺癌，活动性肺结核等），尘肺伴发肺部并发症及患有严重心肺疾病及传染病的煤工尘肺患者为研究对象。收集其肺灌洗液，经纯化后得到肺巨噬细胞，用透射电子显微镜观察其自噬相关结构的形态，包括自噬前体、自噬体、溶酶体和自噬溶酶体。采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白 LC3及自噬调控蛋白 beclin1、mTOR和p-mTOR的表达量，分析接尘观察对象、壹期、贰期、叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动的强弱变化。根据研究对象接尘量的不同分组，分析接尘量对肺巨噬细胞自噬活动的影响。根据研究对象是否脱尘，将研究对象分为间断接尘组和持续接尘组，分析脱离粉尘作业对肺巨噬细胞自噬活动的影响。根据脱尘年限的不同分组，分析脱尘时间长短对肺巨噬细胞自噬活动的影响。 结果：本研究中，接尘观察对象、壹期、贰期、叁期的煤工尘肺患者均为男性、汉族。研究对象的平均年龄为（47.50±6.53）岁（27~64岁）。工种包括采煤工、开拓工、掘进工、运输工、维修工等。叁期煤工尘肺患者的平均接尘年限比接尘观察对象和壹期煤工尘肺患者长。各期煤工尘肺患者的年龄、吸烟率、脱尘率及脱尘年限比较差别无统计学意义。电镜观察发现不同期别煤工尘肺患者肺巨噬细胞中自噬活动不同，贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞中自噬体较壹期增多，但叁期煤工尘肺患者中的自噬体较贰期减少。贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达量高于壹期，叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达量低于贰期，并且叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞 LC3Ⅱ/Ⅰ表达量高于壹期，贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞 Beclin1表达量高于接尘观察对象。贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞mTOR和p-mTOR表达量低于接尘观察对象和壹期，叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞 mTOR和p-mTOR表达量高于贰期。接尘31~40年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中 LC3Ⅱ/Ⅰ的表达量低于接尘21~30年的煤工尘肺患者，接尘31~40年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中 Beclin1的表达量低于接尘0~10年的煤工尘肺患者，接尘31~40年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中 mTOR和p-mTOR的表达量高于接尘21~30年的煤工尘肺患者。比较间断接尘与持续接尘组自噬相关蛋白的表达量，结果显示间断接尘组 LC3Ⅱ/Ⅰ表达量较持续接尘组高，间断接尘组 mTOR和p-mTOR的表达量较持续接尘组低。脱尘1~10年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1的表达量低于脱尘11~20年的煤工尘肺患者。脱尘1~10年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中 mTOR和p-mTOR的表达量高于脱尘11~20年的煤工尘肺患者。 结论：自噬活动减弱可能是影响尘肺肺纤维化进展的原因之一。接尘时间过长会导致肺巨噬细胞自噬活动减弱。接尘工人脱离粉尘作业后肺巨噬细胞自噬活动有恢复的迹象，并且脱尘时间较长的煤工尘肺患者其肺泡巨噬细胞自噬活动较强。
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