摘要
目的:IgA肾病(IgAnephropathy，IgAN)又称为Berger病，是指以IgA或者以IgA为主的免疫复合物沉积于肾小球的系膜区以及毛细血管袢，以反复发生的肉眼血尿伴有或不伴有镜下血尿为其主要临床特征的原发性肾小球疾病，是导致终末期肾衰竭的最主要的原因之一。至今为止，由于对IgAN的发病机制还没有完全清楚，因此目前西医尚无特殊有效的治疗方法。中医在治疗IgAN方面具有一定优势。导师郭登洲教授[1-3］及多位学者[4-5］，结合中医理论，通过对IgAN患者的临床研究指出，中药能改善IgAN患者的临床症状及实验室指标，在IgAN的治疗方面具有一定的作用，并取得了较为满意的临床疗效。因此设计该实验，其目的在于探讨益气养阴，清利湿热方对IgAN大鼠激肽释放酶1(kallikrein1，KLK1)及缓激肽(bradykinin，BK)表达的影响，探寻其可能的作用机制。 方法:将40只体重在140～160g左右的Sprague-Dauley(SD)大鼠，在温度:20℃～24℃，相对湿度:40％-60％的环境中，适应性饲养7天，第7天末检测尿蛋白阴性、潜血阴性者，依据体重随机分为4组，即正常组、中药组、贝那普利组和模型组，每组各10只。运用牛血清白蛋白(BSA)+脂多糖(LPS)+四氯化碳(CCl4)的方法进行IgAN模型的复制[6]，具体方案如下:BSA400mg/kg隔天灌胃，持续6周;蓖麻油0.5mL+CCl40.10mL，皮下注射，每周1次，持续9周;LPS0.05mg尾静脉注射，分别于第6，8周末。正常组大鼠予蒸馏水灌胃，以4ml/kg计算，隔日1次，持续6周;皮下注射生理盐水0.6ml，每周1次，持续9周;于第6、8周末0.2ml生理盐水尾静脉注射。模型复制成功后，中药组予益气养阴，清利湿热中药灌胃，贝那普利组予盐酸贝那普利混悬液灌胃，模型组、正常组予等量蒸馏水灌胃，每日1次，共8周。分别于造模前、第7周末、第9周末、第13周末、第17周末检测24h尿蛋白定量。第18周末将大鼠禁食水12h，称重，按照3.50ml/kg用量将10％水合氯醛注入腹腔，进行麻醉，于腹主动脉取血，测定血清肌酐(Scr)和尿素氮（BUN）的水平。留取肾脏标本，行HE、Masson、PAS、PASM染色，免疫荧光法检测IgA免疫复合物在大鼠肾脏的沉积情况，逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠KLK1和BK的表达情况，免疫组化法测定KLK1的表达情况。 结果: 124小时尿蛋白定量:与正常组相比较，中药组、贝那普利组、模型组大鼠的24小时尿蛋白定量明显升高(P＜0.05)，与中药组、贝那普利组相比较，模型组大鼠的24小时尿蛋白定量明显升高(P＜0.05)，中药组、贝那普利组大鼠的24小时尿蛋白定量无明显差异(P＞0.05)。 2血清Scr、BUN:正常组、中药组、贝那普利组、模型组四组大鼠的血清Scr、BUN各组间比较无明显差异（P＞0.05）。 3光镜下观察，正常组肾小球结构完整，系膜及基质未见明显异常改变;模型组观察到系膜细胞增生、系膜基质增多;中药组与贝那普利组大鼠系膜细胞轻度增生和系膜基质增多，相对于模型组，病变减轻。 4 IgA免疫荧光:正常组大鼠没有观察到肾小球系膜区免疫复合物沉积，在模型组观察到有荧光绿色免疫复合物沉积，贝那普利组、中药组两组大鼠也有不同程度的免疫复合物沉积，与模型组相比较，程度较轻。 5 KLK1在肾脏的表达情况:与正常组相比较，中药组、贝那普利组、模型组大鼠的KLK1表达明显增多(P＜0.05)，与模型组相比较，中药组、贝那普利组大鼠的KLK1表达明显增多(P＜0.05)，中药组、贝那普利组大鼠的KLK1表达无明显差异(P＞0.05)。 6 BK在肾脏的表达情况:与正常组相比较，中药组、贝那普利组、模型组大鼠的BK表达明显增多(P＜0.05)，与模型组相比较，中药组、贝那普利组大鼠的BK表达明显增多(P＜0.05)，中药组、贝那普利组大鼠的BK表达无明显差异(P＞0.05)。 结论: 1 BSA+LPS+CCl4可以成功诱导大鼠IgAN模型。 2益气养阴，清利湿热中药能降低IgAN大鼠24小时尿蛋白定量，进而保护肾功能。 3益气养阴，清利湿热中药能增加大鼠肾脏KLK1及BK的表达，延缓IgAN的发展。 4益气养阴，清利湿热中药能减轻IgAN大鼠的病理损伤，从而延缓疾病进展。
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