摘要
桑枝为桑科(Moraceae)桑属(Morus)落叶灌木或乔木，桑的叶、根、枝、果实均可作为药用。桑枝性苦、平，归肝经，具有祛风湿、利关节、行水之功效，适用于风寒湿痹、四肢拘挛、脚气浮肿之病症。现临床上主要用于治疗肩臂关节及手足酸痛麻木、风湿痹痛、瘫痪等多种疾病。化学成分研究报道桑枝主要含多酚类成分（包括黄酮类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、查耳酮类、Diels-Alder加合物、苯骈呋喃衍生物、二苯乙烯类及其衍生物），其次为生物碱类、多糖类等其他成分，其中多酚类成分也是桑枝最主要的活性成分。现代药理研究表明桑枝具有抗炎等多种药理活性，其抗炎作用与其所含的活性成分密切相关。磷酸二酯酶4(PDE4)是PDE酶家族的一员，主要分布于各种炎症细胞内，可通过抑制PDE4的活性来抑制炎症细胞。因此，PDE4被认为是一种新型抗炎靶标。本课题以PDE4抑制作用为中心，首先对桑枝95％乙醇提取物的各有机萃取相进行了PDE4抑制活性筛选，然后针对乙酸乙酯活性部位进行化学成分研究，旨在获取桑枝中具有PDE4抑制活性的化学成分，为从天然药物中发现PDE4抑制剂先导化合物提供有力的科学支撑，并且进一步证实桑枝是寻找抗炎活性成分的重要药用资源。本研究基于PDE4抑制活性跟踪方法，综合运用多种显色剂相辅助的化学方法结合正相硅胶、反相硅胶、凝胶、半制备高效液相等色谱分离方法，对桑枝中具有显著抑制PDE4靶标的乙酸乙酯活性部位进行了系统的化学成分研究，从中分离得到了16个单体化学成分;采用有机质谱、核磁共振等现代波谱学手段以及物理常数对照等方法将化合物分别鉴定为:5，7-二羟基香豆素(5，7-dihydroxycoumarin，1)、Noratocarpanone(2)、二氢桑色素(Dihydromorin，3)、桑辛素M(Moracin M，4)、氧化白藜芦醇(Oxyresveratrol，5)、熊果酸(Ursolic acid，6)、桑皮酮C(Kuwanon C，7)、桑根皮素(Morusin，8)、2，4-二羟基苯甲醛(2，4-dihydroxybenzaldehyde，9)、伞形花内酯(Umbelliferone，10)、令苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate，11)，桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷(MoracinM-3'-O-β-D-glucopyranoside，12)，顺式氧化白藜芦醇-4-O-β-D-葡萄糖苷（cis-oxyreseratrol-4-O-β-D-glucopyranoside（Ramorin A，化合物13*），2'，4'-二羟基-7，8-(2"-异丙烯基)呋喃基-6-异戊烯基-黄酮醇[2'，4'-dihydroxy-7，8-(2"-isopropenylfuranyl)-6-prenyl-flavonol]（Ramorin B，化合物14*），Mornigrol E（化合物15），Mornigrol F（化合物16），其中化合物13，14为新化合物。 所得化合物包括2个香豆素类（化合物1，10），1个三萜类化合物（化合物6），7个黄酮类化合物（化合物2，3，7，8，14，15，16），2个苯骈呋喃及其苷类化合物（化合物4、12）、2个二苯乙烯类化合物（化合物5，13），2个其它类(化合物9、11)。 运用[3H]标记液体闪烁计数法对其中13个化合物进行体外PDE4抑制活性测试，药理活性测试结果显示4个酚性化合物（化合物4、7、8、16）具有显著的PDE4抑制活性，四者的IC50分别为2.90μM、0.38μM、1.02μM和0.50μM。
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