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茉莉酸甲酯对颠茄毛状根的生长及次生代谢产物产生的影响

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颠茄(Atropa belladonna L.)是茄科颠茄属的重要药用植物。近年来,随着对托品烷类生物碱药理作用的深入研究和广泛应用,围绕颠茄进行的研究很多,而通过诱导子刺激毛状根中次生代谢产物的迅速积累又是其中的研究热点。本文以颠茄毛状根为材料,通过测定生物量与次生代谢产物含量,筛选出最佳培养基。再用不同浓度MJ诱导颠茄毛状根的生长,研究MJ对颠茄毛状根生长、逆境生理特性和主要次生代谢产物含量的影响。主要研究结论如下: 1.本试验研究不同培养基对悬浮培养颠茄毛状根的生长及次生代谢产物含量的影响。试验结果表明:B5培养基与MS培养基中颠茄毛状根生物量显著高于N6培养基,两者之间没有显著差异,但B5培养基中东莨菪碱和莨菪碱含量和产量均显著高于MS培养基。因此选择B5培养基作为悬浮培养颠茄毛状根的基本培养基不仅有利于毛状根的生长,也对托品烷类生物碱的合成有促进作用。 2.本论文探讨了MJ对颠茄毛状根生长及逆境生理特性各指标的影响。由试验结果可以看出MJ对颠茄毛状根生长有抑制作用。MJ诱导处理后,颠茄毛状根主根出现变黄和老化现象,且颠茄毛状根的O2-、水溶性蛋白质、MDA指标、脯氨酸含量均有不同程度的增加或先增加后降低的趋势;其中,10μmol·L-1MJ处理组毛状根中的POD活性最高,随MJ处理浓度的进一步升高,POD酶的活性也随之降低;SOD的活性在20μmol·L-1MJ处理组时最高,其他三个处理组SOD活性没有显著性差异,且均显著高于对照组;CAT活性在40μmol·L-1MJ处理组显著高于对照组和其他三个处理组。结果说明,MJ能促进颠茄毛状根保护酶活力的增强,有利于主要次生代谢产物成分的合成积累。 3.MJ能有效提高东莨菪碱和莨菪碱在颠茄毛状根中的积累。本试验中以10μmol·L-1MJ处理组的莨菪碱含量最高,30μmol·L-1MJ处理组的东莨菪碱含量最高。但由于毛状根生物量的影响,10、20μmol·L-1MJ处理组的单瓶莨菪碱产量与对照组无显著差异,其余两个处理组莨菪碱产量显著低于对照组。30μmol·L-1MJ处理组的单瓶东莨菪碱产量显著高于对照组。检测托品烷类生物碱合成关键酶基因表达量可看出,MJ处理组h6h表达量显著高于对照组,只在10、40μmol·L-1MJ处理组pmt表达量显著高于对照组。推测MJ可以刺激mt、 h6h的表达,并促进东莨菪碱和莨菪碱的积累。

李琳琳

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茉莉酸甲酯 颠茄 毛状根 东莨菪碱 代谢产物

硕士

植物学

吴能表

2015

西南大学

中文

Q94