摘要
目的:研究毛萼清风藤（Sabia limoniacea Wall.）石油醚部位及正丁醇部位的化学成分;建立紫外分光光度法测定毛萼清风藤中总三萜酸含量及高效液相色谱法测定5-甲氧基-1，2-亚甲二氧基氧化阿朴菲碱含量方法，为毛萼清风的开发利用及其质量控制提供科学依据。 方法:毛萼清风藤藤茎粗粉用95％乙醇回流提取得到乙醇总提取物，用系统溶剂分离法将其分为不同极性的四个部位，分别为石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位;采用凝胶柱层析法、重结晶法、硅胶柱层析法、制备型高效液相法等现代分离方法和技术对其石油醚部位及正丁醇部位的化学成分进行分离和纯化，对分得的单体化合物利用理化检验及IR、MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱方法进行结构鉴定;将毛萼清风藤石油醚部位经柱层析分离得到2个油状流份，用0.4mol/L氢氧化钾-甲醇溶液甲酯化处理后，采用GC-MS法对其脂溶性成分进行分离和鉴定。采用紫外分光光度法测定毛萼清风藤中总三萜酸的含量及其提取工艺的优选。利用高效液相色谱外标法测定瑶药毛萼清风藤中5-甲氧基-1，2-亚甲二氧基氧化阿朴菲碱(5-trimethoxy-1,2-methylenedioxyl oxoaporphine)的含量。 结果:从毛萼清风藤石油醚部位和正丁醇部位分离得到16个化合物。经质谱、光谱等方法，鉴定了这16个化合物，分别鉴定为:3-羟基-1-氧-△11，13(18)-齐墩果二烯(1)、齐墩果酸甲酯(2)、5-甲氧基-1，2-亚甲二氧基氧化阿朴菲碱(3)、白桦脂醇(4)、20-二甲基-降乌苏酸(5)、1，3-二羟基-△9，(11)12-齐墩果二烯(6)、齐墩果酸(7)、3，28-二羟基-1-氧-△11，13(18)-齐墩果二烯(8)、二十三烷酸(9)、3-羟基-1-氧-13，28环氧-11-齐墩果烯(10)、1，3，28-三羟基-△9，(11)12-齐墩果二烯(11)、1，3，-二羟基，24-羧基-△9，(11)12-齐墩果二烯(12)、胡萝卜苷(13)、齐墩果酸-3β-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯(14)、3-O-[β-D-xylopyranosyl-(1→4)-β-D-glucuronopyranosyl]-oleanolic acid(15)、3-O[β-D-xylopyranosyl-(1-4)-β-D-glucuronopyranosyl]-28-O-[β-D-glucopyranosyl]-oleanolic acid(16)。采用GC-MS法对毛萼清风藤石油醚部位脂溶性成分进行分离和鉴定，分离出108个成分，并鉴定了其中24个成分。 采用紫外分光光度法测定毛萼清风藤中总三萜酸的含量及其提取工艺的优选。最佳提取工艺为50倍量70％乙醇于常温下超声提取40min;准确吸取样品0.2ml，加入5％香草醛溶液0.2ml，高氯酸0.6ml，70℃水浴15min，冷却，加4ml冰乙酸，于545nm处测定吸光度。在该方法下提取得到的总三萜酸含量相对较高。 采用HPLC法测定毛萼清风藤5-甲氧基-1，2-亚甲二氧基氧化阿朴菲碱（5-trimethoxy-1，2-methylenedioxyl oxoaporphine）的含量，5-甲氧基-1，2-亚甲二氧基氧化阿朴菲碱（5-trimethoxy-1，2-methylenedioxyloxoaporphine）在0.192μg/ml-1.28μg/ml范围内线性关系良好平均回收率为99.12％，RSD为0.99％。 结论:从毛萼清风藤石油醚部位和正丁醇部位分离得到16个化合物。其中化合物1、3、5、8、10、11、12为首次从该植物中分离得到。采用GC-MS法对毛萼清风藤石油醚部位脂溶性成分进行分离和鉴定，鉴定了其中24个成分。采用紫外分光光度法测定瑶药毛萼清风藤中总三萜酸的含量及对其提取工艺的选。最佳提取工艺为50倍量70％乙醇于常温下超声提取40min。确定了以毛萼清风藤中5-甲氧基-1，2-亚甲二氧基氧化阿朴菲碱作为指标成分，建立其HPLC含量测定方法，该方法简单，快速，重复性好，结果准确可靠，为毛萼清风藤药材的质量控制提供了参考依据。
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