摘要
目的： 对霉茶乙醇提取物不同极性洗脱部位进行离体血管实验研究得到霉茶血管药效活性部位。利用正常大鼠离体胸主动脉环和原发性高血压（SHR）大鼠作研究材料，借助分子生物学实验技术研究霉茶提取物对血管结构和功能的影响，并探索其作用机制。以期为霉茶资源的合理开发利用提供理论和实验依据。 方法： 1.霉茶提取物对离体血管环活性部位筛选 首次对霉茶乙醇提取物不同极性提取部位进行离体血管环实验研，观察霉茶乙醇提取物甲醇部位、乙酸乙酯部位、丙酮部位、石油醚部位及氯仿部位对去甲肾上腺素（NA）所致的缩血管反应的影响。 2.霉茶黄酮类成分对离体血管环的作用 对霉茶乙酸乙酯部位离体血管环作用活性追踪,以离体大鼠胸主动脉血管环为研究对象，经生物信号采集系统记录血管环张力变化，观察霉茶总黄酮、二氢杨梅素、杨梅素对血管基础张力的影响以及对NA所致的缩血管反应的影响，并观察二氢杨梅素与杨梅素不同浓度合用的协同作用。 3.霉茶总黄酮对原发性高血压大鼠（SHR）血管舒张功能及重塑的影响 将50只SHR大鼠随机分为模型组、总黄酮低剂量组（90 mg·kg-1）、总黄酮中剂量组（180 mg·kg-1）、总黄酮高剂量组（360 mg·kg-1）和复方罗布麻片组（50 mg·kg-1），每天灌胃给药2次，连续灌胃7周。尾动脉无创测压法观察大鼠血压变化，HE染色测定胸主动脉形态学指标，离体血管张力测定法检测胸主动脉舒张功能反应性，硝酸还原法检测血清NO含量，Real-Time PCR测定胸主动脉组织eNOS、ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2、P27基因的表达。 结果： 1.霉茶提取物乙酸乙酯部位能使NA缩血管的量-效曲线非平行右移并使NA缩血管效能（Emax）降低，而其它霉茶提取部位无显著拮抗NA收缩效应。2.乙酸乙酯部位的主要化学成分霉茶总黄酮、二氢杨梅素、杨梅素均可浓度依赖性增加血管环静息张力；霉茶总黄酮能使NA缩血管的量-效曲线非平行右移并降低其Emax；二氢杨梅素、二氢杨梅素与杨梅素的混合物有与霉茶总黄酮相似的效应且霉茶总黄酮作用强于二氢杨梅素、二氢杨梅素与杨梅素的混合物；二氢杨梅素与杨梅素合用使 NA收缩血管的Emax降低，明显强于二者单独使用；当二氢杨梅素与杨梅素浓度比为10:1时，拮抗NA缩血管的效应最佳。 3.霉茶总黄酮可以抑制SHR大鼠血压随自然病程的上涨，中、高剂量总黄酮能明显降低血管中膜厚度，且高剂量总黄酮能明显降低血管中厚度与管腔直径比；可以剂量依赖性的改善离体 SHR大鼠胸主动脉环对Ach诱导的血管舒张反应，对SNP诱导的血管舒张反应作用无显著差异；中、高剂量总黄酮能明显能上调血管组织中eNOS基因，升高血清中NO含量；霉茶总黄酮各剂量均能下调血管组织中ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2基因同时上调P27基因表达。 结论： 1.霉茶乙醇总提取物的乙酸乙酯洗脱部位有较强的血管调节作用，能抑制NA收缩血管反应，为离体血管环有效活性部位。 2.霉茶乙醇总提取物的乙酸乙酯部位主要成分总黄酮对血管基础张力有剂量依赖性收缩作用但能明显拮抗NA缩血管效应且作用强于二氢杨梅素、二氢杨梅素与杨梅素的混合物；二氢杨梅素与杨梅素对抑制NA诱导血管收缩反应有协同增效作用且最佳协同比例为霉茶总黄酮中原始比例（即10:1）。 3.霉茶总黄酮能缓解高血压症状，改善高血压引起的血管舒张功能失调和血管重塑。上调胸主动脉eNOS基因表达水平，增加NO的合成有关。其抑制高血压引起的血管重塑作用可能与调节RAS系统相关基因及VSMC增殖相关基因有关。
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