摘要
目的： EN2是一种同源异型盒基因,在多种恶性肿瘤中呈高表达,但其在结肠癌发生发展中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨EN2蛋白在结肠癌组织中的表达，并探讨其与临床病理因素的关系，并进一步探讨EN2对结肠癌细胞增殖凋亡的影响。 方法： 收集2012年12月至2013年9月在南昌大学第二附属医院外科手术切除的新鲜94例结肠癌及相应癌旁组织，分别用免疫组织化学和western blot检测结肠癌中EN2的表达。以化学合成法合成的两对特异性EN2-siRNA，并成功转染至结肠癌细胞内。用Western blot、RT-PCR技术分别检测转染siRNA后的EN2蛋白的表达情况，确定抑制效果更佳的siRNA。以MTT法检测结肠癌细胞的增殖,并应用流式细胞术检测细胞凋亡情况。 结果： 1）免疫组织化学检测发现EN2蛋白主要表达于细胞浆，结肠癌组织中EN2蛋白的表达强度65.9%（62/94）明显高于癌旁组织(P<0.05)。Western blot检测结果与免疫组织化学检测结果相似。 2）通过与临床病理资料分析，EN2高表达与肿瘤大小、浸润程度、淋巴结及远处转移密切相关,有淋巴结转移的患者EN2表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。 3）结肠癌细胞中EN2呈高表达。siRNA1干扰效果更明显，通过转染siRNA1和对照组，发现转染48h后,干扰组增殖能力受到明显抑制(P<0.05);细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。 结论： 1）EN2蛋白主要在结肠癌细胞浆表达，结肠癌组织和细胞中EN2高表达。 2）EN2高表达与肿瘤大小、浸润程度、淋巴结及远处转移密切相关,有淋巴结转移的患者EN2表达阳性率更高。 3）下调EN2的表达明显抑制结肠癌细胞增殖，并促进细胞的凋亡。
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