摘要
本文从以下两部分展开了论述： 第一部分 宫颈癌及其癌前期病变患者外周血调节性T细胞的差异分析 目的:调节性T细胞(regulatory T cells，Treg cells)可以抑制免疫系统的抗肿瘤反应，在恶性肿瘤的发生过程中，外周血中Treg细胞的数量随着疾病的严重程度而递增。本研究旨在初步探讨Treg细胞在宫颈癌发生、发展中的可能的作用。 方法:采用流式细胞术检测61例宫颈鳞癌(squamous cellcarcinoma，SCC)，8例宫颈腺癌(adenocarcinoma，ADC)，41例高级别宫颈上皮内瘤变(high-grade cervical intraepithelial neoplasias，HG-CIN)患者和17例健康女性(normal control，NLM)外周血中Treg细胞占CD4+T细胞的比例。 结果:ADC、SCC、HG-CIN患者和正常对照者中Treg细胞占外周血CD4+T细胞的比例（平均值±标准差）分别为:10.73±2.88％、10.31±2.45％、9.20±2.28％和7.88±1.18％，各组间差异有显著性(P=0.001)。在宫颈鳞状上皮病变中，外周血中Treg细胞的水平随着病变的恶性程度逐渐升高(SCC＞HG-CIN＞NLM，P＜0.001)。在总共69例浸润性宫颈癌中，根据2009 FIGO分期，Ⅰ期为37例，Ⅱ期患者为32例。17例(24.6％)患者术后被发现有盆腔淋巴结转移。恶性程度较高的肿瘤中Treg细胞的数量高于恶性程度较低的肿瘤中该细胞的数量，包括FIGOⅡ期高于Ⅰ期(10.67±2.67％vs10.00±2.24％);肿瘤直径＞4 cm高于肿瘤直径≤4cm(10.68±2.31％vs10.04±2.63％);有盆腔淋巴结转移的肿瘤高于无盆腔淋巴结转移的肿瘤(11.06±2.56％vs10.13±2.44％)。但经统计检验，Treg细胞的数量未被发现和肿瘤的临床分期、盆腔淋巴结转移、脉管浸润、肿瘤大小及纤维肌壁浸润程度有相关性(P＞0.05)。 结论:本研究发现宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者外周血中调节性T细胞比例增高，并且与宫颈上皮恶性转化的程度呈正相关，但其在浸润性宫颈癌形成后的进展过程中的作用价值有待进一步探讨。 第二部分 临床早期宫颈癌患者循环和局部肿瘤微环境中免疫T细胞及其亚群的检测 目的:本研究旨在揭示早期宫颈鳞状细胞癌患者的外周血和局部肿瘤微环境中T淋巴细胞各类亚群的免疫应答特点。 方法:采用多色流式细胞术对46例早期宫颈鳞状细胞癌患者（其中38例患者获取了新鲜的宫颈局部肿瘤组织）和16例正常人中外周血的CD4+、CD8+T淋巴细胞以及CD4+Foxp3+T淋巴细胞（Treg细胞）进行计数，三类淋巴细胞再分别根据其表面标志物进一步分群。 结果:宫颈癌患者外周血中CD4+T细胞的比例（平均值±标准差）显著高于正常对照者（58.20±9.37％vs52.49±7.09％，P＜0.05），而CD8+T细胞的比例显著低于正常对照者（29.18±8.00％vs34.11±7.11％，P＜0.05）。在肿瘤微环境中，恶性表型较高的肿瘤患者CD4+T细胞的比例显著高于恶性表型较低的肿瘤患者，包括其在肌层浸润＞1/2层的肿瘤中高于肌层浸润≤1/2层的肿瘤（45.52±2.56％va33.57±4.23％，P＜0.05），有盆腔淋巴结转移的肿瘤明显高于无盆腔淋巴结转移的肿瘤（47.75±2.93％vs38.46±3.23％，P＜0.05），有脉管浸润的肿瘤显著高于无脉管浸润的肿瘤（48.76±2.56％vs37.13±3.31％，P＜0.05）;与恶性表型较低的肿瘤患者相比，恶性表型较高的肿瘤患者肿瘤浸润性CD8+T细胞的比例显著降低，具体表现在:其在肌层浸润＞1/2层的肿瘤低于肌层浸润≤1/2层的肿瘤(41.42±2.59％vs57.65±4.82％，P＜0.05)，有盆腔淋巴结转移的肿瘤明显低于无盆腔淋巴结转移的肿瘤（39.47±3.40％vs50.19±3.40％，P＜0.05），有脉管浸润的肿瘤显著低于于无脉管浸润的肿瘤（37.83±2.88％vs52.14±3.43％，P＜0.05）。在肿瘤微环境中，不论CD4+T细胞还是CD8+T细胞，效应记忆性T细胞(Effectormemory T cells，Tem)占大多数(83.83±8.25％vs88.31±9.36％)，并且其比例显著高于外周血中的比例(29.28±14.02％vs35.82±14.71％，P＜0.05);而初始T细胞的比例（1.30±1.89％vs1.24±1.38％）显著低于外周血中的比例（32.40±15.07％vs27.91±17.73，P＜0.05）。在宫颈癌患者的外周血中，恶性表型较高的肿瘤患者CD4+Tem细胞的比例显著高于恶性表型较低的肿瘤患者，包括其比例在有盆腔淋巴结转移的肿瘤中明显高于无盆腔淋巴结转移的肿瘤（35.54±14.24％vs27.05±11.19％，P＜0.05），在有脉管浸润的肿瘤中显著高于无脉管浸润的肿瘤（34.78±13.44％vs26.27±11.38％，P＜0.05）;而在肿瘤微环境中，恶性表型较高的患者CD8+Tem细胞的比例显著低于其在恶性表型较低的肿瘤患者中的比例，主要表现在其比例在肌层浸润深度＞1/2层的肿瘤中显著低于浸润深度≤1/2层的肿瘤（86.35±10.37％vs93.03±3.43％，P＜0.01），在有盆腔淋巴结转移的肿瘤中明显低于无盆腔淋巴结转移的肿瘤（83.99±12.38％vs90.67±6.40％，P＜0.05）。宫颈癌患者外周血中Treg细胞和Helios+ Treg细胞的比例分别为7.51±1.92％和66.12±13.16％，显著高于其在正常对照者中的比例（6.16±1.89％和50.79±10.59％，P值均＜0.05）。肿瘤微环境中终末效应型Treg细胞的比例显著高于外周血(43.91±21.17％vs6.15±9.08％，P＜0.05)，而初始Treg细胞的比例显著低于外周血(0.45±0.32％坩19.89±9.77％，P＜0.05)。此外，在有脉管浸润和淋巴结转移的宫颈癌患者外周血中，Treg细胞的比例显著升高。 结论:在早期宫颈癌的局部抗肿瘤免疫应答中，不同恶性表型的肿瘤存在不同的免疫应答反应。其中外周血中Treg细胞的比例升高以及肿瘤微环境中CD4+T细胞比例的升高、CD8+T细胞和CD8+Tem细胞比例的降低与肿瘤的侵袭及转移有相关性。
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