摘要
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是威胁人类的重要病原菌，是临床上常见的致病菌之一，它可黏附于医疗器械表面、人类组织器官表面形成生物膜，导致反复发作、难以彻底治愈的疾病，如慢性呼吸道感染、肺结核、前列腺炎等。目前临床上常用抗生素类药物治疗生物膜引起的感染，但由于耐药菌群的大量出现，迫切需要寻找一种新型高效的药物治疗生物膜引起的感染。本文对黄芩素抑制Staphylococcus aureus26112生物膜形成的作用机制进行了研究，结果如下: (1)本文采用刚果红平板法及结晶紫半定量法筛选得到一株产膜菌株—Staphylococcus aureus26112(SA26112)，并测定了该菌株生物膜的形成过程，实验结果显示，培养3d的SA26112菌株能形成成熟的生物膜; (2)采用TTC法及平板法测定了黄芩素对SA26112菌株生物膜形成的抑制作用，实验结果显示，黄芩素能抑制SA26112菌株生物膜的形成，其MIC和MBC均为0.04mg/ml; (3)本文测定了黄芩素对SA26112菌株成熟生物膜的作用，结果显示，黄芩素能使成熟生物膜变薄，但不能完全杀死膜内的细菌; (4)采用TTC法测定了黄芩素与环丙沙星联用后对SA26112菌株成熟生物膜的作用，实验结果显示，当黄芩素浓度为0.12mg/ml、环丙沙星为16μg/ml时能完全杀死生物膜内的细菌; (5)通过Dot-blot法检测黄芩素对SA26112菌株PIA合成的影响，发现随着黄芩素浓度增加PIA合成量减少，当浓度为1MIC(0.04mg/ml)时可明显抑制PIA合成; (6)通过微量紫外分光光度计测定黄芩素对SA26112菌株eDNA释放量的影响，发现随着黄芩素浓度增加eDNA释放量逐渐降低，当黄芩素浓度达到1MIC(0.04mg/ml)时eDNA的释放量减少了97％(p＜0.01); (7)通过RT-PCR技术测定黄芩素对SA26112菌株icaA及cidA基因表达量的影响，结果显示随着黄芩素浓度的增加基因的表达量降低，当浓度达到1MIC(0.04mg/ml)时，与对照组相比icaA及cidA基因的表达量均分别减少了62％和41％(p＜0.01)。
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