摘要
褐藻糖胶的提取方法主要有热水提法、碱法、酸法、酶法、微波提取法以及超声波提取法。其中,热水浸提法简单易于操作,但提取温度高,时间长,耗能多,并且多糖得率及纯度较低。酸法和碱法能够得到较多的多糖,但是会影响获得的多糖的生物活性。超声波法提取率好但是对设备的要求较高,因此很难适用于大规模的工业化生产。而酶法是一种作用条件温和的对多糖生物活性损害较小的提取方法,相对于热水提取法可以显著提高褐藻糖胶的得率,同时也适用于大规模的工业化生产,是一种高效节能的提取活性多糖的方法。本文以市售海带为原料,比较了水提法和酶法对褐藻糖胶提取率的影响,研究了水提法和酶提取法中影响褐藻糖胶得率的因素,同时进行正交试验,以多糖提取率为技术指标提取褐藻糖胶,确定了最优提取工艺。提高海带多糖提取率和减少海带加工过程中废弃物的浪费。并在此基础上对褐藻糖胶的分离纯化技术进行初步的研究。 (1)采用水提法和酶提取法从海带中提取褐藻糖胶,实验证明水提取法的提取率为18.28%但使用复合酶法提取处理工艺,多糖提取率为45%,较水提法提取率提高了近3倍。 (2)确定了酶法最佳工艺条件为:纤维素酶0.5%,复合蛋白酶0.5%,果胶酶0.5%,中性蛋白酶1.0%,温度60℃,pH6.0,酶解时间5 h。在此条件下,褐藻糖胶粗品提取率为45%,多糖纯度为2.48%。 (3)采用苯酚—硫酸法、硫酸钡比浊法、考马斯亮蓝法、高效液相色谱法等对提取的褐藻糖胶进行定性定量分析。 (4)采用凝胶过滤层析对复合酶法提取的褐藻糖胶进行纯化,比较不同的分离条件对分离效果的影响,同时与高效液相色谱(HPLC)法相比较,确保结果的真实可靠。