摘要
实验目的： 建立以胡椒碱为指标的那如-3缓释微囊制剂的体外分析方法；对那如-3缓释微囊制剂的处方组成及制备工艺进行方法学研究；对那如-3缓释微囊制剂进行药效学及药动学评价。 实验方法： 分析方法部分：采用HPLC法，建立那如-3缓释微囊中胡椒碱的载药量及包封率的测定方法；采用UV法，建立缓释微囊在不同释放介质、不同转速条件及不同介质体积下的累积释放度测定方法；采用HPLC-MS法，建立那如-3缓释微囊制剂中胡椒碱及乌头碱在大鼠体内的分析方法。制备工艺部分：采用喷雾干燥法制备那如-3缓释微囊，通过单因素试验及正交优化试验筛选最佳处方组成及制备工艺，同时对最佳工艺进行了重复性验证，并对制备的缓释微囊进行质量评价。药动学部分：雄性Wistar大鼠20只，按体重随机分成两组，将市售那如-3味丸与那如-3缓释微囊制剂进行单剂量灌胃给药试验，分别按设计好的时间点眼底静脉丛取血，血样适当处理，测定血药浓度并进行药动学评价。药效学部分：取昆明小鼠若干，按体重随机分成5 组，每组10只，雌雄兼有，采用热板法、醋酸扭体法、足趾肿胀法及耳廓肿胀法，对那如-3缓释微囊制剂的抗炎镇痛效果进行评价。 实验结果： 1.胡椒碱在HPLC法和UV法的测定条件下浓度与峰面积和吸光度均能呈现良好线性关系。（r>0.999，n=6），回收率符合要求，精密度和稳定性均良好，可以满足那如-3缓释微囊的载药量、包封率及释放度的测定要求。释放度测定方法为：中国药典2010年版二部附录溶出度测定法第二法（桨法），以900mL脱气处理的新鲜蒸馏水为释放介质，在转速100r·min-1，介质温度为 37±0.5℃的条件下，分别于0、0.5、1、2、4、8、10、12 、24h分别取样10mL。 2.那如-3缓释微囊最佳处方组成为：乙基纤维素-N20的质量浓度为2%，囊材乙基纤维素与囊芯那如-3提取物比重为3:1，增塑剂PVPk30与囊材乙基纤维素质量比为 1:3，抗粘剂二氧化硅的质量浓度为 0.1%；最佳制备工艺为：药物溶液加入至包衣液搅拌时间为 20min，进风温度为110~120℃，雾化压力 0.6~0.8 MPa，进液速度为 15 mL min-1。 可制备出形态圆整、粒径均匀，载药量、包封率、体外释放重现性等均良好的缓释微囊万方数据2内蒙古医科大学硕士研究生学位论文（2015年）制剂。 3.市售那如-3味丸和那如-3缓释微囊中乌头碱与胡椒碱的体内释药行为均符合单室模型：市售那如-3味丸中胡椒碱的Tmax、Cmax 、AUC 0-∞分别为 (0.90±0.03)h、(75.99±2.40)ng·mL-1、(268.31±10.07)ng·h·mL-1；乌头碱的 Tmax、Cmax、AUC0-∞分别为(0.72±0.02)h、(6.22±0.21)ng·mL-1、(26.61±1.31)ng·h·mL-1；那如-3 缓释微囊制剂中胡椒碱的 Tmax、Cmax、AUC0-∞分别为(2.45±0.09)h、(35.01±1.45)ng·mL-1、(270.96±11.03)ng·h·mL-1；乌头碱的 Tmax、Cmax、AUC 0-∞分别为(2.47±0.17)h、(2.95±0.09)ng·mL-1、(27.11±1.04)ng·h·mL-1。那如-3 缓释微囊与市售那如-3 味丸相比，其乌头碱及胡椒碱的Tmax 明显延长、Cmax 显著降低，其差异具有统计学意义（p<0.05），药-时曲线下面积AUC 0-t、AUC 0-∞无显著性差异（p>0.05）。那如-3 缓释微囊中胡椒碱和乌头碱的相对生物利用度分别为 (100.99±5.03)%、(101.88±7.19)%。采用 Wagner-nelson 法进行体内外相关性分析，得回归方程为：F(t)=1.145 f(t) + 224.6，（r=0.7183），结果体内吸收百分数F(t) 与体外释放百分数f(t) 具有相关关系（p<0.05）。 4.那如-3缓释微囊可以明显提高小鼠痛阈值，减少醋酸致小鼠的扭体次数，抑制角叉菜胶致小鼠足趾肿胀和二甲苯致小鼠耳廓肿胀，具有较好抗炎镇痛效果；那如-3缓释微囊高、中、低三种剂量在治疗过程中存在一定的量效关系，随着给药剂量的增大，小鼠初始痛阈值也随之增加。 实验结论： 文章建立的那如-3缓释微囊体内外分析方法的测定指标基本合理，可以做为缓释制剂的质量标准；实验制备的那如-3缓释微囊的性能良好，具有明显缓释效果；抗炎镇痛作用显著；血药浓度较平稳，生物利用度和体内外相关性均良好，达到了实验的预期目的。为新制剂的进一步研究奠定了坚实的实验基础，同时也为中国传统药物新剂型的研发提供参考。
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