摘要
第一部分 SMS1在B细胞活化中的作用的初步探讨 【目的】：通过检测和比较鞘磷脂合成酶1（sphingomyelin synase1,SMS1）敲除小鼠（Knock out,KO）即SMS1-/-小鼠和野生型Wild小鼠（wild type,WT）即SMS1+/+小鼠B细胞的活化功能。 【方法】：断颈处死SMS1-/-或SMS1+/+小鼠，超净台解剖取小鼠脾脏，研磨脾脏，离心，获得外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC)，细胞计数；磁珠分选获得B细胞；分选后的B细胞给予不同浓度抗体刺激，浓度设为F(ab’)2抗IgM抗体：0，1，5，10，20μg/ml，细胞培养72h，流式检测B细胞表面CD69，IgM，CD40，CD80，CD86，霍乱毒素B(cholera toxin B,CTB)的表达。 【结果】：B细胞表面 CD69表达的百分比和平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）均出现明显的浓度依赖性，即随着刺激抗体浓度的增加，CD69的表达也增加；且KO小鼠的表达明显弱于WT小鼠。IgM的检测结果提示：抗体刺激B细胞活化后，B细胞表面IgM表达的百分比明显减少，且SMS1-/-小鼠的表达略低于SMS1+/+小鼠；IgM表达的MFI两者相比未见明显差异。CD40检测结果提示：抗体刺激前后B细胞表面的CD40表达百分比和MFI均无明显差异。CD80的表达：KO小鼠B细胞CD80表达的MFI弱于WT小鼠，且两者均在刺激抗体浓度为5μg/ml时表达的MFI出现峰值。CD86和CTB的表达:KO和WT小鼠相比结果未见明显差异性。 【结论】：SMS1-/-小鼠B细胞的活化功能存在异常，其活化功能较SMS1+/+小鼠弱。据此可推测SMS1的缺失可能导致B细胞活化功能的异常。 第二部分血清IgG4水平在不同疾病中的检测 【目的】：应用我们实验室建立的稳定的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测IgG4相关性疾病（IgG4-related disease，IgG4-RD）及其他疾病中血清IgG4水平，并比较免疫比浊法和ELISA方法两种不同的方法检测血清IgG4水平。 【方法】：收集2013年3月12日至2014年7月1日共957例患者血清标本（包括12例IgG4-RD和945例非IgG4-RD标本），采用ELISA方法检测957例患者血清IgG4水平。同时，送检其中80例血清标本至我院检验科应用免疫比浊法检测IgG4水平。 【结果】：12例IgG4-RD患者血清IgG4水平均升高(>1.35g/L)，非IgG4相关性疾病中血清IgG4阳性的比例为3.39%，在肿瘤疾病中IgG4的阳性率为2.05%，自身免疫性疾病中的阳性率为6.3%。且免疫比浊法和ELISA方法检测血清IgG4水平的结果具有一致性。 【结论】：我们实验室建立的ELISA体系方便可行，具有稳定性，可广泛用于临床血清IgG4水平的检测。血清IgG4水平升高不仅见于IgG4-RD，也见于其他疾病，特别是肿瘤，自身免疫性疾病。
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