摘要
目的：生理水平的ROS（reactive oxygen species）是维持男性正常生殖功能所必须的，但是过量的ROS容易引起氧化应激损伤。P38MAPK（mitogen-activated protein inase，MAPK）是哺乳动物内广泛存在的一类丝/苏氨酸蛋白激酶,在凋亡、细胞因子产生、转录调节以及细胞骨架识别中起着重要作用。研究表明小豆蔻明（Cardamonin，CAR）能够明显抑制P38MAPK磷酸化。本课题旨在考察CAR是否可以保护氧化损伤的精子，并探讨其可能的机制，以期寻找一种安全有效的治疗男性不育的药物。 方法：⑴精子悬液分为6组：正常对照组，加入Earle’s培养液；LPS组，加入LPS；LPS+CAR(0.5μM)组；LPS+CAR(1μM)组；LPS+CAR(2μM)组；LPS+Vic(2μM)组。LPS的终浓度为1μg·mL-1。各组样本置于37℃,5%CO2培养箱中孵育15h。⑵测定指标及方法：倒置相差显微镜测定精子总活力；倒置相差显微镜测定精子尾部低渗膨胀率；荧光显微镜观察精子顶体完整率；荧光显微镜测定DFI；流式细胞仪检测精子凋亡率；NBT比色法测定活性氧含量；TBA法测定丙二醛(MDA)含量；WST法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性；Western-Blot法检测P38MAPK、p-P38MAPK蛋白的表达 结果：①在脂多糖诱导的氧化损伤中，CAR明显提高精子活力以及降低凋亡率和DFI（P<0.01）；并且CAR显著提高精子膜低渗彭胀率和顶体完整率（P<0.01），其中高剂量组CAR的作用较强；②CAR显著降低ROS含量和MDA含量，并且明显提高SOD活力（P<0.05），其中高剂量组CAR的作用较强；③CAR可剂量依赖性抑制LPS刺激引起的P38MAPK磷酸化（P<0.05）,并且CAR对P38MAPK总蛋白的表达无显著性影响；④LPS组的P38MAPK磷酸化表达量以及ROS含量与正常对照组相比均显著升高（P<0.05），并且P38MAPK的磷酸化表达量与ROS的含量呈正相关。 结论：CAR可提高SOD活力和降低ROS、MDA含量，保护精子氧化应激损伤；其机制可能与剂量依赖性抑制P38MAPK磷酸化有关。
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