摘要
大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)是一种原产中国的世界性蔬菜。随着全球变暖,高温胁迫(heat stress,HS)严重影响着大白菜的生产。热激转录因子(Heat shocktranscription factors,Hsfs)是调节植物响应高温胁迫的主要因子,参与调节热激蛋白(Heat shock protein,HSP)的表达,对植物抵抗高温逆境伤害和其他生命活动具有关键作用。随着大白菜基因组测序的完成,使得在基因组水平上研究大白菜Hsf家族的信息成为可能。本研究以大白菜基因组数据为基础,利用生物信息学方法对大白菜Hsfs进行了序列特征,系统发育关系,染色体定位和基因表达,相互作用网络等方面的分析;另外将大白菜和甘蓝Hsfs进行了比较分析。其研究结果如下: 1.大白菜至少含有30个Hsf基因成员,编码239~487个氨基酸,分子量27.93~54.49kDa;等电点4.66~9.16;除2个基因分布在Scaffold上,其余28个基因在大白菜的10条染色体上呈不均匀分布。甘蓝至少含有36个Hsf基因成员,编码219~495个氨基酸,分子量25.69~55.38kDa;等电点4.62~10.22;10个基因分布于不同的Scaffold上,其余26个基因不均匀的分布在9条染色体上。 2.多序列比对发现,大白菜和甘蓝Hsfs都具有高度保守的DBD结构域和广泛的保守基序,也有少数蛋白发生了不同程度的插入扣缺失,大白菜发生了2个插入和1个缺失,而甘蓝则发生了5个缺失,没有发生氨基酸的插入,这些插入和缺失事件可能是大白菜和甘蓝Hsf蛋白产生遗传多样性的一个原因。 3.模式植物拟南芥、大白菜和甘蓝Hsfs的系统发育分析表明,这些Hsf基因家族成员可以分为A、B、C三类,A类和B类可进一步分为8个和4个亚类,A类Hsfs的保守性明显高于B类和C类;系统发育树还揭示了在这三个物种中,共存在28对直系同源基因和2对旁系同源基因,表明Hsf转录因子在大白菜、甘蓝和拟南芥基因组中具有广泛的共同祖先,Hsf基因家族的多样化存在于十字花科植物分化之前,并且在甘蓝基因组中发生了基因重复。 4.大白菜的表达分析发现,大白菜Hsfs在5个组织(果,根,茎,花,叶)中呈差异性表达,大多数Hsfs参与大白菜地下部分的生长发育,并调控大白菜的生殖生长。另外大白菜直系同源基因的相互作用网络包含了MBF1C、ROF1、TBP2、CDC2和HSP70五个基因,其中HsfA1分别扣HSP70、TBP2以及CDC2相连接,这可能是因为HsfA1在Hsf家族中特异的调控功能。这些结果将有助于更好地理解Hsf基因家族的复杂性,并为进一步解剖HSF的功能奠定基础。