摘要
脊髓灰质炎病毒（简称脊灰病毒）感染可引起急性肠道传染病脊髓灰质炎（简称脊灰），其主要病状为肢体麻痹、下肢发育不全和功能障碍，并造成终身残疾。脊髓灰质炎减毒活疫苗（Oral Polio Vaccine, OPV）和脊髓灰质炎灭活苗(Inactive Polio Vaccine, IPV)是主要的流行病学预防手段。但是，在使用OPV的国家发现了罕见的疫苗相关麻痹型脊灰和疫苗衍生脊灰病毒病例，这提示我们进一步加强对疫苗生产的质量控制力度十分必要，准确排查疑似脊灰患者的手段仍需加强。 本研究旨在构建三型脊髓灰质炎病毒株（sabin I型、sabin II型和sabin III型）的假病毒颗粒Armored RNA-sab I、Armored RNA-sab II和Armored RNA-sab III，并以构建得到的假病毒颗粒作为实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）的阳性标准品，实现对待测样本中脊髓灰质炎病毒拷贝数的测定。 本研究中使用PAR工程质粒作为载体，分别连接脊髓灰质炎病毒株sabin I型、sabin II型和sabin III型的特异基因片段sab I、sab II、sab III，得到的重组质粒转化后筛选阳性克隆。经鉴定的重组菌株在LB培养基中振荡培养、诱导后富集菌体，然后进行裂解和核酸酶处理，制备假病毒颗粒Armored RNA-sab I、Armored RNA-sab II和Armored RNA-sab III的粗提液。假病毒颗粒粗提液经核酸水平和蛋白质水平检测后，用来制作qRT-PCR标准曲线的标准品发挥其适用功能。
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