摘要
恶性肿瘤是当前危害人类健康的主要疾病之一。长期以来，寻找用于恶性肿瘤治疗的药物一直是全世界药物研发的热点，上世纪六十年代，人类发现了一类无机化合物铂类配合物的抗癌活性。如今，铂类药物已经被应用于85%的肿瘤治疗方案中。金属钌配合物被认为是最具有发展潜力的抗肿瘤药物之一。但是，在铂类药物的临床使用过程中，其缺点也开始日益凸显，其毒副作用如肾毒性、骨髓毒性、耳毒性、外周神经毒性、催吐性及长期使用产生的耐药性等，以及铂类药物对一些肿瘤的治疗无效，这使其应用受到限制。因此，寻找新的抗肿瘤金属配合物引起了更多研究者的关注。 本课题通过设计合成不同钌金属配合物，研究其生物活性，经过筛选得到了14种具有较强抗肿瘤活性的钌金属配合物，使用MTT检测、配合物的内吞实验、吖啶橙和溴化乙啶双染实验、细胞周期检测试验、细胞活性氧水平检测试验、线粒体膜电位检测、单细胞凝胶电泳检测、蛋白免疫印迹法等实验方法，通过对Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3、Hela等肿瘤细胞的作用研究，初步证实这些新型钌配合物具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，并在此基础上试图探讨配合物诱发肿瘤细胞凋亡的相关机理。 以下将分章介绍研究的具体内容。 第一章前言以钌金属配合物为主介绍金属配合物的研究及应用现状。 第二章合成新型配体CPIP，并与五个辅助配体bpy、phen、dmb、dip、dmp反应合成五个新的钌金属配合物，分别简称为C1、C2、C3、C4、C5。检测配合物对NIH-3T3、Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3五种细胞的抑制作用。发现这些化合物对Bel-7402细胞的IC50较低。通过内吞实验结果、吖啶橙和溴化乙锭双染实验结果和线粒体膜电位检测结果可以初步判断，配合物进入细胞内，并通过线粒体途径诱导细胞凋亡。 第三章合成新型配体DCPIP，并与五个辅助配体bpy、phen、dmb、dip、dmp反应合成五个新的钌金属配合物，分别简称为D1、D2、D3、D4、D5。检测配合物对NIH-3T3、Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3五种细胞的抑制作用。发现这些化合物对Bel-7402细胞的IC50较低。内吞实验发现配合物进入Bel-7402细胞的内部，活性氧及线粒体膜电位实验结果显示，这些配合物通过线粒体途径引起Bel-7402细胞凋亡。 第四章合成新型配体ATATP，并与四个辅助配体bpy、dmb、phen、dmp反应合成四个新的钌金属配合物，分别简称为M1、M2、M3、M4。检测这些配合物对于NIH-3T3、Bel-7402、Mg-63、A549、Hela五种细胞的抑制作用。发现这些配合物对于Hela细胞的IC50较低。染色结果显示，化合物进入细胞内部，活性氧及线粒体膜电位实验结果显示，其诱发细胞凋亡的途径也是线粒体途径。 第五章通过蛋白免疫印迹法、单细胞凝胶电泳等方法重点研究C4和D1诱导Bel-7402细胞凋亡的相关机理，研究M1诱导Hela细胞凋亡的相关机理。结果显示，Bcl-2、Bcl-x等蛋白表达量下调，Caspase-3、Caspase-7、Bax、Bad表达量上调。实验结果证实，C4和D1是通过线粒体途径诱导Bel-7402细胞和Hela细胞凋亡。
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