摘要
山奈素在山奈、槐角、银杏、金钱草等中药材中均含有，但在槐角中山奈素醇苷含量最高，成熟期槐角可达7%左右，槐树在全国各处均有分布，槐角产量十分丰富。国内有关槐角的上市制剂数量屈指可数，因此该中药综合开发利用不高。山奈素药理作用主要有：抗癌、抗氧化、抗病毒、免疫调节作用、预防心血管疾病等。因此本文旨在优化山奈素分离提纯工艺并初步测定其降血糖活性，为槐角中山奈素开发利用提供一定参考，本文主要研究内容如下： （1）生长周期中槐角中4种黄酮成分变化规律的考察:对槐角按其生长周期进行每隔15天采样，烘干后粉碎，测定槐角中槲皮素、山奈素、染料木素、异鼠李素4种黄酮组分含量，结果表明:生长期槐角中槲皮素含量先高后低，7月初未开花前含量最高为12.4%。染料木素在8月中旬开始形成，含量逐步提高，到10月中旬含量趋于稳定，约5.6%。在8月中旬，山奈素达到最大值，约为6.2%。7月初时，异鼠李素含量最高，约为1.3%。因此槐角中4种黄酮含量有显著季节变化规律，以槐角为原料提取4种不同黄酮苷元，其采摘时间是提取槲皮素和异鼠李素为7月初，提取染料木素为12月初，提取山奈素为8月中旬，而提取总黄酮则在12月初采摘 （2）山奈素分离纯化中试工艺优化研究:在原有专利技术山奈素纯化工艺基础上，将槐角提取物水解得到山奈素粗品，并以此为原料，优化其分离纯化工艺，确定山奈素中试分离提纯工艺参数：山奈素粗提物溶于60%乙醇溶液中，料液比1g:100mL；按照山奈素粗品：聚酰胺=3:5的比例上聚酰胺柱，流速：20ml/min，1BV60%乙醇洗柱，收集滤液，旋蒸至无醇味后过滤干燥，得92%山奈素黄色粉状晶体。 （3）山奈素单体分离研究:高含量山奈素经过硅胶柱二次纯化能得到纯度98%的山奈素晶体，第一次过柱纯化时流动相为石油醚：丙酮：甲酸=2:1:0.025，第二次为石油醚：乙醚：甲酸=1:1:0.035。此方法可以很好的将山奈素和杂质分离，获得含量在98%山奈素单体用于药理活性研究。 （4）降血糖活性测试:依靠贵州省生化工程中心的中试基地、贵州省天然产物实验室，探究山奈素的降血糖活性，纯度98%山奈素促进细胞消耗葡萄糖的作用与二甲双胍相当。山奈素晶体对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制活性，且抑制活性大于阿卡波糖。 综上所述，确定了聚酰胺大孔树脂柱层析分离纯化工艺取代原有的有机溶剂萃取、多次反复重结晶工艺，使工艺操作更简易，生产成本更低，且得率回收率更高，更适合工业化生产,且发现山奈素对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制活性，且抑制活性大于阿卡波糖,且促进细胞消耗葡萄糖的作用与二甲双胍相当。以上研究结果将为槐角中山奈素开发利用具有参考意义.
NETL