摘要
目的： 通过构建稳定过表达双链RNA结合蛋白2（TRBP2）基因的细胞株，探讨TRBP2对人肺腺癌细胞A549体外增殖、侵袭、迁移能力的影响及可能机制。 方法： 1.构建 TRBP2慢病毒过表达载体,以不同感染复数(MOI)感染A549细胞,根据绿色荧光强度选择最适MOI值。筛选并获得稳定表达绿色荧光蛋白的细胞株。 2.实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测TRBP2、MMP-2及PKR mRNA表达 3.免疫蛋白印记（Western blot）法检测 TRBP2、MMP-2、p-PKR及PKR蛋白的表达。 4.采用MTT法、平板克隆实验检测各组细胞增殖能力。 5.采用 transwell小室，粘附实验检测各组细胞迁移、侵袭及同、异种细胞间粘附能力。 结果： 成功构建了 TRBP2基因过表达的 A549细胞系。过表达 TRBP2慢病毒感染组细胞体外侵袭、迁移能力明显增强（P<0.05），同种细胞间黏附力减弱(P<0.05)而异种细胞间粘附能力明显增强(P<0.05)；增殖和克隆形成能力增强（P<0.05）；MMP-2、TRBP2蛋白及mRNA表达量升高（P<0.05），PKR蛋白及mRNA表达量无差异（P>0.05）、p-PKR蛋白表达量降低（P<0.05）。 结论： 该研究表明,过表达TRBP2基因可能通过促进MMP2的表达同时抑制PKR磷酸化,而促进肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭。
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