摘要
目的：研究GPER介导的ITGB1的表达在乳腺癌他莫昔芬（tamoxifen）耐受中发挥的作用，并探讨其分子机制。 方法：运用免疫组化方法分析经他莫昔芬治疗复发前后的乳腺癌组织中ITGB1的表达，并比较EMT相关蛋白的表达差异。采用Western blot检测人乳腺癌MCF-7细胞及其他莫昔芬耐受细胞株（MCF-7R）中ITGB1的表达。前期cDNA芯片发现ITGB1是GPER的下游基因，应用GPER特异性的激动剂G1及其特异性阻断剂G15验证芯片结果。通过使用小分子阻断剂研究GPER调控ITGB1的机制。构建ITGB1基因干扰慢病毒，并建立稳定干扰ITGB1表达的MCF-7R细胞。MTT及Transwell实验分别检测ITGB1对乳腺癌细胞增殖与迁移能力的影响。 结果：复发乳腺癌组织中ITGB1及间质细胞标志物（Fibronectin及Vimentin）的表达水平明显高于复发前组织（p<0.05），且ITGB1的表达与GPER有正相关性（p=0.001）。MCF-7R细胞中ITGB1的表达明显高于MCF-7细胞（p<0.05），且MCF-7R细胞中ITGB1的表达受GPER/EGFR/ERK信号通路调控。MCF-7R细胞干扰ITGB1表达后不仅恢复其对他莫昔芬的敏感性，而且抑制了CAF对其迁移能力及EMT的促进作用。ITGB1下游的FAK、Src及AKT在MCF-7R细胞中活化程度较MCF-7细胞高（p<0.05），且介导MCF-7R细胞与CAF细胞间的相互作用。 结论：GPER/EGFR/ERK信号通路的活化使乳腺癌细胞中ITGB1的表达升高，同时伴随其下游信号通路的活化，从而导致MCF-7R细胞与CAF细胞间的联系增强，最终引起肿瘤细胞的进展及耐药。因此，ITGB1可能是提高乳腺癌患者内分泌治疗效果的潜在靶点。
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