摘要
目的：毛蕊老鹳草（Geranium eriostemon Fisch.ex DC.）是牻牛儿苗科老鹳草属多年生草本植物。目前关于黑龙江省产毛蕊老鹳草的系统性研究报道很少，大部分为生药鉴定及药用化学成分的研究等方面。因此本课题选择毛蕊老鹳草为研究对象，旨在为进一步改进毛蕊老鹳草有效成分提取技术奠定基础，为其制定质量标准，更合理开发和利用这一药用资源提供依据。 方法：取新鲜的毛蕊老鹳草为实验材料，采用石蜡切片技术，分别制作根、茎、叶、花梗的永久切片，置于显微镜下观察并拍照。采用超声提取法对毛蕊老鹳草有效化学成分总黄酮及鞣质进行提取，通过球面对称设计优化，得到总黄酮及鞣质的最佳提取工艺。水分含量的测定参照GB5009.3—2010中的直接干燥法测定。灰分含量的测定参照GB5009.4—2010灼烧法测定。采用紫外分光光度法对样品中矿质元素含量进行测定。采用热提取法对莽草酸进行提取，提取工艺为15倍量水80℃提取100min，提取液浓缩，经柱层析得莽草酸粗粉，采用高效液相色谱法进行莽草酸纯度检测，色谱条件为：色谱柱为Agilent C18(150 mm*4.6mm,5μm)，流动相为0.1%磷酸溶液-甲醇(90:10)，流速为1.0 mL/min，检测波长为214nm，柱温为25℃。应用凝血酶原试剂盒对所得的莽草酸样品进行抗凝血活性检测。 结果：毛蕊老鹳草根皮层细胞内含有方晶、草酸钙簇晶以及淀粉粒，维管束无限外韧型，形成层明显；叶为异面叶，主脉维管束外韧型，栅栏组织、海绵组织分化明显，叶肉组织中可见草酸钙簇晶；花梗表皮可见毛茸，皮层约占花梗横断面的1/4，维管束外韧型，4~5束。通过球面对称设计优化，得到总黄酮的最佳提取工艺为：40倍量60%乙醇提取35min。鞣质的最佳提取工艺为：24倍量20%乙醇提取50min。不同时期毛蕊老鹳草的总黄酮含量为：5月1.59%、6月1.78%、7月1.87%、8月1.95%、9月1.80%；不同时期毛蕊老鹳草中鞣质的含量为：5月2.13%、6月3.32%、7月3.68%、8月3.20%、9月2.78%。测得毛蕊老鹳草中灰分含量为28.67%、水份含量为8.16%；铁元素含量223.6μg/g、锌元素含量445.7μg/g、锰元素含量303.9μg/g、铜元素含量209.1μg/g、钾元素含量868.9μg/g、钙元素含量1951.9μg/g、镁元素含量1347.8μg/g。经计算莽草酸的纯度为44.3%。 结论：对毛蕊老鹳草不同部位的组织观察中发现，根、叶、花梗的维管束均为外韧型维管束，花梗维管束4~5个。通过最佳提取工艺，确定总黄酮在8月份时最高，鞣质含量在7月份时最高，因此7~8月份最适宜毛蕊老鹳草的采收。毛蕊老鹳草中矿质元素含量丰富。经体外抗凝血活性研究表明，毛蕊老鹳草中莽草酸具有一定的抗凝血活性。
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