摘要
长喙壳类真菌(Ophiostomatoid fungi)是重要的昆虫伴生真菌和木材变色菌，也是松材线虫病木和天牛坑道及蛹室中最常见的真菌种类之一。我国对松材线虫的伴生真菌，特别是长喙壳属的真菌缺乏系统的分类鉴定及发育研究。本研究通过对我国松材线虫病高发区浙江省富阳、余姚、舟山的松材线虫染病马尾松、黑松木材及山东省威海、长岛的染病黑松木材天牛坑道内的长喙壳类真菌进行了分离，以此为供试材料，分别从培养特征、形态学特性、温度适应性、多基因序列特征及系统发育等方面对该类真菌进行了鉴定，研究结果如下: 组织分离与单孢分离共获得30多个属，1235株菌株，其中长喙壳类真菌254株，包括Ophiostoma属248株和Ceratocystiopsis属6株，其鉴定为Ophiostoma ips、O.deltoideosporum、Ceratocystiopsis minuta、O.sinosaponiodorum sp.nov.、Ophiostoma sp.、O.cf.rectangulosporium、O.cf.kryptum7个种，除去O.deltoideosporum外，浙江省马尾松上均有分布，而黑松上仅有O.ips一个种，而山东省黑松上分离到的伴生菌有O.ips、O.deltoideosporum、C.minuta3个种。说明不同区域、不同树种的松材线虫伴生长喙壳类真菌的多样性是不同的。 分离获得的Ophiostoma ips是松材线虫病伴生菌的优势种，占长喙壳类分离株的90.16％，其分布没有明显的区域及树种差异。该类真菌最适生长温度均为30℃，5℃条件下仍能生长;形态学特征研究表明，菌株CXY1635的子囊壳颈部直径为3977.58μm，远远超出了O.ips种颈部长度的范围(648～2045μm)。结合形态学与多基因片段的系统发育分析，补充了O.ips的形态特征，并首次确定了O.ips与松材线虫病的紧密伴生关系。 形态学鉴定结合ITS及β-tubulin基因的多基因序列系统发育分析，发现了松材线虫病木中长喙壳类真菌的一个新种O.sinosaponiodorum sp.nov.。该种在2％ MEA培养基上的菌落形态与O.saponiodorum相似，系统关系最近，但形态学特征差异明显:O.sinosaponiodorum sp.nov.子囊壳颈顶端有6～14根透明的放射状的孔口缘丝，子囊孢子肾形，两端较尖，而O.saponiodorum子囊壳颈顶端无孔口丝，子囊孢子肾形，两端较圆。 O.deltoideosporum和C.minuta为中国松材线虫病木上的新纪录种。C.minuta经过序列分析发现与北美的C.minuta菌株关系最为密切，可能为新种。 浙江富阳和余姚的松材线虫病木上还发现一未定种，其子囊壳球形，黄褐色或黑色，无喙，周围包裹大量黑色的菌丝，菌丝透明无格，众多分支，顶端或侧部萌发分生孢子，分生孢子卵形，单胞无色，培养期内未观察到有性态孢子，暂定名为Ophiostoma sp.。
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