摘要
背景： 在全球范围内，乳腺癌是威胁女性健康的主要公共卫生问题之一。在西方国家，乳腺癌的发病率尤其高。在2015年，美国女性乳腺癌新发病例数及死亡人数分别为23.2万例和4万例。在我国，乳腺癌已成为女性最常见的恶性肿瘤，并且近年来，乳腺癌的年龄标准化发病率和死亡率均有明显的上升趋势。流行病学研究显示，某些西方化的生活方式和乳腺癌之间有很强的联系。膳食脂质的摄入，肥胖和饮酒都可能会增加患乳腺癌的风险。肿瘤患者的血清脂蛋白谱表明，在肿瘤进展过程中，血浆高密度脂蛋白(High-density lipoprotein，HDL)的水平受影响的程度最大。 B类Ⅰ型清道夫受体(Scavenger receptor class B typeⅠ，SR-BⅠ)是分子量为82-kDa的膜糖蛋白，其作为高密度脂蛋白(HDL)受体，在胆固醇逆向转运中起重要作用。人SR-BⅠ主要在肝脏和合成类固醇的器官组织中表达，如肾上腺、卵巢和睾丸，正常乳腺组织表达极少。SR-BⅠ在HDL代谢中起着至关重要的作用，另外参与脓毒症和丙型肝炎病毒进入肝细胞的过程。既往一些文章报告了HDL和肿瘤之间复杂的关联，也间接推论出SR-BⅠ在肿瘤中可能存在某些潜在的作用。既往许多研究报道在某些肿瘤细胞系可探测到SR-BⅠ的高表达，包括肝癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌和鼻咽癌。在乳腺癌的研究中，有报道称SR-BⅠ参与乳腺癌的发生和发展，其机制是通过SR BⅠ介导HDL胆固醇酯的选择性吸收和启动下游PI3K/Akt信号通路。然而，SR-BⅠ在乳腺癌组织中的表达情况及其临床意义尚没有相关研究报道。 在本课题中，我们首先利用组织芯片免疫组织化学技术检测了SR-BⅠ在150例乳腺癌组织标本的表达情况，分析了SR-BⅠ的表达与患者各临床病理变量、预后的关系，证实SR-BⅠ的表达与pTNM分期、淋巴结分期、淋巴结转移的阳性率、肿瘤直径、ER的阴性相关，同时也是影响乳腺癌预后的独立危险因素。其次，我们利用成年C57BL/6小鼠构建低血浆胆固醇模型、高血浆胆固醇模型，采用Western Blot技术探讨小鼠乳腺组织SR-BⅠ在不同血浆总胆固醇水平的表达情况，证实了小鼠乳腺组织SR-BⅠ的表达不受普罗布考降脂药物或高脂饲料喂养的影响。SR-BⅠ在乳腺癌中的临床意义以及调控其表达的机制有待于进一步研究。 目的： 1.采用含150例乳腺癌组织标本的组织芯片检测SR-BⅠ蛋白的表达情况。 2.分析SR-BⅠ的表达与乳腺癌患者各临床病理变量之间的关系，并探讨SR-BⅠ的表达状态与患者的预后关系，以期寻找新的乳腺癌预后指标和潜在的治疗靶点。 3.探讨降脂药物和高脂血症对小鼠乳腺组织SR-BⅠ表达的影响。 方法： 1.以购自上海芯超生物科技有限公司的乳腺癌组织芯片为研究对象，芯片含有150例乳腺癌组织标本，利用免疫组织化学技术检测组织芯片中乳腺癌的SR-BⅠ蛋白表达水平，分析其表达与乳腺癌患者临床病理参数间的相关性，并进一步分析SR-BⅠ的表达状态与乳腺癌患者预后的关系。 2.为探讨小鼠乳腺组织SR-BⅠ在不同血浆总胆固醇水平的表达情况，将成年C57BL/6雌性小鼠随机分为三组，分别给予正常饲料、0.2％普罗布考药物饲料、高脂饲料喂养7天并收集血标本、乳腺组织。检测血浆总胆固醇水平。Western Blot检测三组小鼠乳腺组织SR-BⅠ表达情况。 结果： 1.在乳腺癌组织标本中，大于90％的样本表现为SR-BⅠ的广泛表达。癌旁组织SR-BⅠ不表达。在可用于分析的143例乳腺癌样本中，77例(54％)为SR-BⅠ高表达，66例(46％)为SR-BⅠ低表达。 2.SR-BⅠ的表达水平与pTNM分期(P=0.002)、淋巴结分期(P=0.012)、淋巴结转移的阳性率(P=0.002)、肿瘤大小(P=0.023)和ER的阴性(P=0.014)相关。与T分期、PR、HER2、三阴性（ER、PR和HER2阴性）状态、肿瘤分级和年龄无明显相关。 3.在乳腺癌组织中，SR-BⅠ高表达的患者比SR-BⅠ低表达的患者总体生存率(OS)显著缩短（log-rank检验，P=0.004）。10年生存率在SR-BⅠ低表达的乳腺癌患者中为80％，而在SR-BⅠ高表达的乳腺癌患者中为60％。Cox回归多因素分析提示SR-BⅠ的高表达是影响预后的独立不良因素，HR为2.3(P=0.017)，除了SR-BⅠ之外，ER的表达状态也是乳腺癌患者预后的独立因素(P=0.047)。 4.0.2％普罗布考药物饲料组小鼠血浆总胆固醇水平较正常饮食组明显降低，差异有统计学意义(P=0.022);高脂饲料组小鼠血浆总胆固醇水平相比正常饮食组则明显升高，差异有统计学意义(P=0.007)。 5.SR-BⅠ在正常饮食组、0.2％普罗布考药物饲料组和高脂饲料组这三组小鼠乳腺组织的表达并无明显差异。 结论： 1.SR-BⅠ高表达与乳腺癌恶性程度更高有相关性，即在肿瘤pTNM分期越晚，N分期越高，肿瘤直径越大和ER阴性的病例标本中，SR-BⅠ高表达的比率更高。 2.SR-BⅠ是影响乳腺癌预后的独立危险因素，SR-BⅠ的高表达状态与乳腺癌患者不良预后有关，可能作为乳腺癌诊治和预后的重要分子标记物。 3.小鼠乳腺组织SR-BⅠ的表达不受普罗布考降脂药物或高脂饲料喂养的影响。
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