摘要
鸢尾属(Iris L.)是单子叶植物鸢尾科最大的一个属，北陵鸢尾（Iris typhifolia Kitag.）是鸢尾科鸢尾属多年生草本植物，我国具有丰富的鸢尾属野生资源，这些野生资源蕴含着丰富的优良基因，能够为品种改良和种质创新提供优良丰富的自然资源。本研究以北陵鸢尾叶片总RNA为模板，采用同源序列方法克隆得到一段编码280个氨基酸序列的DREB基因蛋白，命名为ItDREB，并通过转基因技术分析基因的生物学功能。实时荧光定量PCR分析结果表明，ItDREB基因在北陵鸢尾幼苗中可以被干旱和高盐所诱导表达，推测其是在干旱和高盐信号通路中起作用的。本文主要研究结果如下： 1.首次从从北陵鸢尾中分离的DREB基因属于AP2基因家族，具有AP2保守结构域。氨基酸比对结果表明:ItDREB与绿芦笋AoDREB、美花兰CiDREB和小麦TaDREB氨基酸序列具有较高的同源性，推测其功能也相似。 2.采用RT-PCR方法对ItDREB因子的组织特异表达特性和逆境胁迫下表达特性进行分析，ItDREB因子在各组织中均有不同程度的表达，不具有组织表达的特异性。在不同胁迫下基因的表达结果表明该基因在干旱和高盐条件下能够明显的被诱导，而在低温诱导下基因的表达量变化不显著，只能被微弱的表达。 3.构建了植物表达载体pBI121-DREB，通过农杆菌介导的叶盘转化法将此载体转入野生烟草中获得了转基因烟草，对转基因烟草的PCR检测证实了外源基因已经成功整合到了烟草的基因组中。 4.构建了植物表达载体pBI121-DREB-GFP，利用基因枪将GFP融合蛋白pBI121-DREB-GFP打入到新鲜的洋葱表皮细胞中，最终得到GFP融合蛋白pBI121-DREB-GFP在洋葱表皮的细胞质中表达的结论。
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