近年来,随着对蓖麻油需求的增大,研究者们对蓖麻的生产和加工的重视程度越来越高,蓖麻矮化遗传育种成为人们研究的热点。蓖麻矮化相关基因的发掘是蓖麻矮化分子育种的关键,对蓖麻遗传育种具有重要意义。赤霉素(gibberellin,GA)作为一种重要的植物激素,在调节植株生长和发育过程中具有重要作用。有研究表明外施GA可以影响蓖麻植株的株高。赤霉素代谢途经中的GA2ox可以影响GA的生物合成。为探究蓖麻RcGA2ox对蓖麻表型的作用机制,本研究以通蓖5号(高秆蓖麻品种)和CRS268(矮秆蓖麻品种)为亲本培育出来的BC2F2矮秆子代为材料,通过对RcGA2ox进行筛选,克隆,转化通蓖5号,获得转基因植株,鉴定转基因植株,推测RcGA2ox的作用机制。主要研究结果如下: 1.通过生物信息学分析发现,蓖麻RcGA2ox基因家族的三个基因,通过荧光定量PCR分析结果显示,高矮秆植株中差异表达明显的为: XM_002515190.2。 2.克隆了RcGA2ox基因,测序结果通过BLAST比对,与已知序列相似度达到100%。 3.将RcGA2ox基因连接到pCAMBIA1305.2表达载体上,插入为点位为NcoⅠ和SpeⅠ,得到pCAMBIA1305.2-RcGA2ox表达载体;再通过液氮冻融法,将其转化到农杆菌GV3101感受态中。 4.通过蓖麻子叶节抗性筛选实验,确定了通蓖5号蓖麻的子叶节对HYG的抗性浓度为7mg/L;通过农杆菌介导法将pCAMBIA1305.2-RcGA2ox转化蓖麻子叶节,抗性筛选后得到TB5RcGA2ax矮化转基因植株。 5.转基因植株与野生型植株在现蕾期的茎秆对比发现,转基因植株的节间长度短于通蓖5号植株,且转基因植株中RcGA2ox的表达量高于野生型植株的RcGA2ox的表达量,由此确定RcGA2ox为蓖麻矮化相关基因。