摘要
马甲子 Paliurus ramosissimus(Lour.) Poir.系鼠李科铜钱属植物,又名铁篱笆、铜钱树。马甲子药材(叶)味苦,性平,能祛风散瘀,解毒消肿。主治风湿痹痛,跌打损伤,咽喉肿痛,痈疽。此外,经本课题组的前期研究证实其乙醇提取物具有抗肿瘤方面的作用且疗效较好。 化学成分预试验结果表明马甲子叶提取物中含有三萜类、生物碱类、香豆素类、黄酮类等成分。相关文献报道所含的三萜类成分主要包括24-羟基美洲茶酸二甲酯,27-羟基美洲茶酸二甲酯,美洲茶酸,美洲茶酸-28β-葡萄糖酯和异美洲茶酸-28β-葡萄糖酯等。还含有一种环肽生物碱马甲子碱(paliurine)B。但该药的相关药效成分未见报道。 为了探索马甲子叶中的抗肿瘤活性成分,我们对马甲子叶中的某些成分进行了提取分离、结构鉴定和抗肿瘤等方面的研究,得到了新的活性单体成分A和成分B,经 MS、1H-NMR、13C-NMR等鉴定成分A为2α,27-2(p-hydroxy trans cinnamoyloxy)-betulinicacid。该单体系首次从该属植物中分离得到的新化合物。为了进一步研究该成分,制定了本文的含量测定方法。 以该单体化合物为指标成分,采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6mm×100mm×2.4μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm。研究结果表明,该方法快速,准确,重现性好,可用于测定马甲子药材中成分A的含量。马甲子药材中成分A含量的测定能够初步评价不同产地及采收期马甲子药材的质量,为后续研究及民间癌症患者用药提供了一定的参考。为了便于后期的研究,我们对该药材进行了提取纯化方面的研究。 以成分A的含量为指标,针对马甲子药材中成分A的提取工艺进行了研究。通过前期的单因素试验初步确定了提取工艺并采用L9(34)正交试验对提取工艺进行了优化,得到最佳工艺为10倍量95%的乙醇回流提取1 h。结果表明,最终所确定的提取工艺稳定、可靠。 通过比较9种大孔吸附树脂对马甲子提取物中成分A的静态及动态吸附试验,选取了最佳树脂型号并对其纯化工艺条件进行了优化,得到最佳工艺参数为:采用X-5型大孔吸附树脂,马甲子药材提取物的上样量为0.1 g/g湿树脂,浓度为100g/L的上样溶液以1 BV/h的流速进行吸附,后使用95%乙醇以1.5 BV/h的流速洗脱,洗脱剂用量为8BV。此工艺条件下,成分A得到了较好的富集纯化,马甲子提取物中成分A的含量由原来的1.68%提高到8.92%,转移率达到了85%。本次研究结果为后续的研究奠定了基础,具有一定的指导意义。