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斑马鱼甘露糖受体的分子克隆和功能研究

郑菲菲

斑马鱼甘露糖受体的分子克隆和功能研究

郑菲菲1
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作者信息

  • 1. 华中农业大学
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摘要

甘露糖受体(mannose receptor,MR)是一种模式识别受体(pattern-recognitionreceptors,PRRs),在病原微生物引起的机体免疫应答中至关重要。关于哺乳动物和鸟类的甘露糖受体研究很多,但是鱼类甘露糖受体的研究甚少。本论文分离并鉴定了温和气单胞菌是斑马鱼的致病菌,在此基础上,研究了斑马鱼甘露糖受体和温和气单胞菌感染的关系,主要结果如下: 1.克隆得到了斑马鱼的甘露糖受体基因全长,命名为zfMR,基因的cDNA全长为6248 bp,其中5'UTR为119bp,3'UTR为1842 bp,ORF为4287 bp,编码1428 aa。预测的氨基酸序列表明,zfMR包含一个富含半胱氨酸区域,一个Ⅱ型纤连蛋白区域,八个串联的C型凝集素样区域,一个跨膜结构域和一个胞质尾区。构建的进化树表明,斑马鱼zfMR与草鱼和团头鲂的MR聚为一支组成硬骨鱼类分支。 2.甘露糖受体的mRNA在健康斑马鱼的肝脏、脾脏、肾脏、肠道、鳃、脑、心脏、肌肉和皮肤中均有表达,并且在肾脏中的的表达水平最高。 3.温和气单胞菌感染斑马鱼后,用qRT-PCR方法检测到其免疫相关组织(肝脏、脾脏、肾脏和肠道)中的zfMR和炎症因子(IL-1β和TNF-α)mRNAs的表达量均有上调。免疫组织化学分析表明,斑马鱼的脾脏和肠道的zfMR蛋白表达有轻微的增加,表明zfMR在抵抗细菌感染的先天性免疫调节中扮演一定的角色。 本论文建立了斑马鱼-温和气单胞菌感染模型,可以为进一步研究甘露糖受体在病原体感染引起的免疫应答作用提供重要模型。

关键词

斑马鱼/甘露糖受体/温和气单胞菌/分子克隆/免疫应答

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授予学位

硕士

学科专业

水产动物医学

导师

林蠡

学位年度

2016

学位授予单位

华中农业大学

语种

中文

中图分类号

S9
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