摘要
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)是一种小的嗜肝DNA病毒，目前全球至少有2.5亿人为慢性HBV感染者。慢性HBV感染是肝硬化、肝细胞癌等终末期肝病的重要原因，每年全球约有65万人死于HBV感染相关的肝硬化、肝细胞癌。虽然十余年来不断有新的核苷类抗HBV药物被批准用于乙肝治疗，但这些药物，以及干扰素-α均仅能抑制病毒复制，并不能彻底清除病毒。HBV基因组形成共价闭合环状DNA(cccDNA)，以类似于微染色体的形式稳定存在于肝细胞的细胞核内。目前的乙肝治疗药物都极难清除cccDNA，这是乙肝治疗所面临的最大困难。 建立能模拟人类HBV感染的小动物模型对于HBV感染、致病机制研究以及抗HBV药物研发极为重要。尽管研究人员已建立了多种支持HBV复制的小鼠模型，但在这些小鼠模型的肝组织内均不存在cccDNA。HBV基因组为部分双链的环状DNA，聚合酶基因与S、C、X基因重叠，C基因和X基因之间也有部分重叠。Gunther等首次报道将线状单拷贝HBV基因组PCR产物直接转染细胞可检测到HBV复制，提示线状单拷贝HBV基因组在细胞内可连接环化形成双链环状DNA。本研究中，我们将HBV单拷贝基因组PCR产物直接转染人肝癌和非肝癌细胞系，均在细胞培养上清中检测到HBeAg。进一步用高压水动力法将线状单拷贝HBV基因组DNA尾静脉注射小鼠，在小鼠肝细胞内检测到HBcAg，血清中检测到HBsAg和HBeAg，随后小鼠血清发生抗原-抗体转换，出现anti-HBc、 anti-HBs以及anti-HBe。本研究建立的小鼠模型，无论是血清中的HBV抗原水平还是抗原持续时间，与质粒pAAV-HBV1.2注射的小鼠总体相似，显示其可作为一种新的HBV感染模型。 本模型的建立方法简单易行，尤其适合针对临床HBV血清标本快速建立小鼠感染模型，且该模型中的HBV基因理论上能形成闭合双链环状结构，类似于cccDNA，因而可能在cccDNA降解机制以及药物清除干预方面具有重要用途。
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