摘要
目的: 本课题的研究旨在了解人细小病毒B19(human parvovirus B19，简称B19)在重庆市无偿献血人群中的流行特点，为建立适合重庆市无偿献血者筛查B19病毒的检测流程提供依据。课题通过分析无偿献血者中B19 IgG阳性率、B19 IgM阳性率、两种抗体均阳性率、两者均阴性率、B19 DNA阳性率和B19病毒在无偿献血人群中的分布特征，即流行情况与性别、年龄、献血季节有无明显的相关性，以及了解B19病毒与输血相关传染病感染性病毒的共感染情况，获得重庆市献血人群中B19病毒的血清流行病学调查资料和分子流行病学调查资料，以期能为无偿献血者的筛查工作提供一定的参考资料，同时为重庆乃至全国将来制定更加科学合理的输血安全策略提供数据支持。 方法: 1.样本收集 从经过输血相关传染病(HIV、HBV、HCV、梅毒螺旋体等)感染标志物和丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测，结果均合格的献血者样本中，每月随机抽取至少50份，即每季度不少于150份无偿献血者血样，全年共随机抽样752份样本。从输血相关传染病(主要是HIV、HBV、HCV)感染标志物检测阳性的献血者样本中，随机抽取385份样本。 2.合格的献血者样本血清学检测 用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对752份无偿献血者血液样本分别进行B19 IgG抗体和B19 IgM抗体筛查。分别获知IgG、IgM阳性率、两种抗体均阳性率和两者均阴性率，分析重庆市无偿献血者中人细小病毒B19感染者的流行率。同时，根据血清学检测结果分析人类细小病毒B19 IgG和B19 IgM抗体阳性率与献血人群的性别、年龄、职业、血型、居住地、献血季节等有无明显的相关性。 3.不合格的献血者样本血清学检测 用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对385份不合格无偿献血者的血液样本分别进行B19 IgG和B19 IgM抗体筛查，分别获知IgG、IgM阳性率、两种抗体均阳性率和两者均阴性率。根据血清学检测结果分别分析人类细小病毒B19 IgG和B19 IgM抗体在HIV、HBV、HCV阳性献血者样本中的阳性率情况，了解B19病毒感染与这些输血相关性感染病毒之间有无明显的相关性。 4.分子生物学检测 提取752份合格血液样本的DNA，采用ABI PRISM7900实时荧光定量PCR仪进行PCR扩增及结果分析，获得合格献血者中B19 DNA阳性率，及B19病毒在无偿献血人群中的分子流行病学情况。 结果: 1.在752份合格无偿献血者样本中，B19 IgG阳性率为36.70％; B19 lgM阳性率为5.59％，两者比较有统计学差异(P＜0.001)。IgG、IgM抗体均阳性14份(1.86％)，IgG、IgM抗体均阴性448份(59.57％)。女性lgM抗体阳性率高于男性(P＜0.05）;根据统计分析发现年龄和居住地为B19病毒感染的影响因素，年龄段分别在36-45岁、46-55岁阶段的比18-25岁的阳性发生率高(P=0.000);居住地在区县的阳性发生率高于主城区。 2.在385份不合格献血者样本中，B19 IgG阳性率为38.18％; B19 lgM阳性率为5.19％，两者比较有统计学差异(P＜0.001)。IgG、IgM抗体均阳性11份(2.86％)，IgG、IgM抗体均阴性229份(59.48％)。女性lgM阳性率高于男性（P＜0.05）;不同年龄段中lgG阳性率随着年龄增长而升高(P＜0.05），lgG感染率随着文化程度的降低成增长趋势(P＜0.05），lgG阳性率在主城区与其它区县比较有统计学意义(P＜0.05)。HIV感染者中B19 IgG阳性率为29.91％、IgM阳性率为6.54％，两抗体均阳性率为5.61％;HBV感染者中B19 IgG阳性率为36.92％、IgM阳性率为6.15％，两抗体均阳性率为3.85％，HCV感染者中B19 IgG阳性率为43.97％、IgM阳性率为2.59％，未发现两抗体均阳性者。 3.运用实时定量PCR对752份合格无偿献血者血液样本进行检测，检出B19 DNA阳性3份，阳性率为0.40％。 结论: 1.重庆市合格献血人群中存在B19病毒既往感染和急性感染者，且有感染者体内维持有一定的病毒含量。虽然与其他地区的无偿献血人群中B19血清流行率比较，重庆市处于相对较低的水平，但目前尚未在无偿献血者中开展B19病毒特异性抗体筛查情况下，是否存在输血传播该病毒的风险，还需进一步NAT检测。 2.通过调查重庆市B19病毒在不合格献血人群中，主要是HIV、HBV、HCV阳性献血者的流行情况可知，B19病毒对免疫力低下人群易感。 3.通过对B19病毒在重庆市无偿献血者中的分子流行病学情况进行调查，结果进一步表明重庆市有在B19病毒急性感染期参加献血的献血者，B19病毒在重庆无偿献血者中处于载量低且呈低流行趋势。 4.我国目前还没有对血液及血液制品进行这项筛查，研究结果可为卫生行政部门将来制定相关的血液筛查策略提供数据支持。
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