摘要
本研究以圆叶椒草的叶片、叶柄及茎段为外植体,开展了圆叶椒草器官发生和胚状体发生途径的研究,并对圆叶椒草组培苗进行了驯化和壮苗试验,主要研究结果如下: 1.圆叶椒草器官的发生 1.1研究发现,茎段和叶柄为不定芽诱导的最佳外植体,其灭菌最佳处理:叶柄用0.1%HgC12灭7min;茎段0.1% HgCl29min+75%酒精30s。 1.2结果表明叶片与茎段的最佳不定芽诱导培养基均为6-BA2mg/L+IBA0.5mg/L、叶柄为6-BA2mg/L+IBA0.2mg/L,但诱导愈伤组织的最佳培养基不同。继代培养中结果表明:不定芽团增殖的最适宜培养基为6-BA2mg/L+GA30.3mg/L+IBA0.3mg/L。单芽茎段增殖的最适宜培养基为6-BA0.5mg/L+GA30.3mg/L。 1.3试验结果发现最适宜生根培养基是1/2MS+IBA0.2mg/L+活性炭1gL。另外,通过添加不同浓度的珍珠岩发现能够有效的减少气生根的发生。 2.圆叶椒草胚状体的研究 2.1诱导圆叶椒草叶片愈伤的培养基为6-BA1mg/L+2.4-D3mg/L,发现该愈伤在光照和暗培养下都可以形成胚状体。 2.2结果表明:胚状体固体增殖的培养基为6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L,其中对胚状体增殖的作用效果依次为为6-BA>NAA>蔗糖。在培养方式上,液体比固体的增殖效果好。 2.3胚状体分化成苗的试验中,试验结果表明:6-BA1.5mg/L+IBA0.1 mg/L为最佳的分化培养基。在接种方式上,发现团块(2-3个球形胚状体)的接种分化率最高,其液体悬浮培养物亦可分化成苗。 3.圆叶椒草组培苗移栽及壮苗技术研究 试验表明,先闭瓶5d,后开瓶2d,移栽成活率高;在湿度方面,发现每三天施一次水,移栽成活率高;在基质方面,珍珠岩∶草炭=1∶3对于移栽的成活率最佳。壮苗试验中发现花多多1号(20-20-20)1500倍和2000倍、花多多8号(20-10-20)800倍时,壮苗系数显著高于其它各处理组,对试管苗的壮苗效果好。