摘要
副猪嗜血杆菌（H. parasuis）定殖于猪上呼吸道，为一种条件致病菌，急性感染可导致全身性疾病，感染后主要的病理表现为关节炎、肺炎、浆膜炎和脑膜炎。对我国乃至全世界养猪业造成了巨大的经济损失，是目前危害全球养猪业最严重的细菌病之一。 按照琼脂扩散试验和间接血凝试验（IHA）对H. parasuis进行血清分型，H. parasuis至少可分为15个血清型，但约20%的分离株无法分型。目前，市场上还没有一种疫苗对所有血清型的H. parasuis感染都能产生有效的免疫保护作用。H. parasuis的一些分泌蛋白和外膜蛋白被认为是有效的保护性抗原，有作为有效疫苗的候选抗原的潜力。最近，本实验室通过蛋白质组学技术从H. parasuis血清5型参考菌株Nagasaki中筛选到7个分泌蛋白（CdtB, CdtC, AfuA, HbpA, OppA, HktE, HPS-04307），为了评价上述7个蛋白用于制备重组亚单位疫苗的潜力，本研究将 cdtB和cdtC基因进行了克隆（另5个蛋白的重组载体已由本实验室构建完成），并以His融合蛋白的形式进行了表达和纯化。初期以各蛋白对小鼠进行免疫攻毒试验，从中筛选到5个保护作用较好的重组蛋白（rCdtB, rCdtC, rAfuA, rOppA, rHPS-04307），并再次以小鼠模型评价了这5个蛋白混合后的免疫保护效力。在小鼠模型中，所有蛋白都能诱导机体产生体液免疫反应并对血清5型HN10菌株和13型ZD12菌株的H. parasuis攻毒产生不同程度的免疫保护作用，5个蛋白混合后对小鼠的保护率最高（对H. parasuis血清5型HN10和13型ZD12菌株的免疫保护率分别为85%和60%）。此外，全血杀菌实验结果表明各蛋白的抗血清能够有效地抑制 H. parasuis的生长，淋巴细胞增殖试验结果表明各蛋白能够显著刺激小鼠 T淋巴细胞增殖。本研究表明 rCdtB, rCdtC, rAfuA, rOppA, rHPS-04307能够对致死剂量的H. parasuis血清5型HN10和13型ZD12感染产生有效的免疫保护作用，为新一代多组分疫苗的研制提供了重要参考。
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