摘要
糖尿病属于一种慢性代谢性疾病，已成为世界死亡率排名第四的疾病。糖尿病对患者健康最大的威胁源于其严重的并发症，如伤口难愈合、糖尿病性肾脏疾病、视网膜病变、周围神经病变等。难愈性创面常伴随伤口反复感染，导致局部组织缺血坏死，缺乏有效治疗手段，因此成为目前研究热点。黄芪甲苷（AS-IV）作为黄芪主要的有效成分，研究显示在抗炎和免疫调节方面发挥重要作用。本课题拟建立糖尿病小鼠难愈伤口模型，研究AS-IV在促进皮肤伤口组织愈合中的作用，并探讨其相关的作用机制，为临床上难愈性伤口组织治疗提供新的思路。 研究目的： 观察AS-IV在糖尿病小鼠难愈伤口模型中的作用，研究AS-IV促伤口组织修复的免疫调节机理；体外研究AS-IV对小鼠成纤维细胞（NIH3T3）增殖和趋化等生物学功能的影响，初步探讨AS-IV促进糖尿病小鼠难愈伤口组织修复的机制。 研究方法： 建立糖尿病小鼠难愈伤口模型，伤口组织局部给予AS-IV处理，在不同时间点观察伤口愈合面积和愈合率的变化，观察AS-IV的作用效果；组织病理学检测伤口组织局部ECM的形成、新生血管和肉芽组织的生成；体外检测AS-IV对NIH3T3细胞增殖和趋化的影响，探讨AS-IV对巨噬细胞极化的调节作用。 研究结果： 1. AS-IV促进糖尿病小鼠难愈性伤口的修复 建立糖尿病小鼠难愈性伤口模型，给予AS-IV处理后，小鼠伤口愈合时间明显缩短为13天。组织病理学显示伤口肉芽组织、新生血管和ECM的形成速度明显高于对照组，免疫荧光显示伤口局部组织中M2型巨噬细胞水平升高。 2. AS-IV对NIH3T3生物学活性的影响 AS-IV处理NIH3T3细胞后，明显上调NIH3T3细胞的趋化、增殖和分泌功能。 3. AS-IV对巨噬细胞极化的影响 AS-IV单独处理未能影响M1/M2型巨噬细胞极化，但与IL-13协同时能诱导巨噬细胞向M2型极化，同时上调M2型巨噬细胞相关分子如CD206的表达。 4. AS-IV调节巨噬细胞极化对NIH3T3细胞功能活性的影响 AS-IV协同IL-13培养巨噬细胞后，其上清液明显增强NIH3T3细胞的趋化、增殖和分泌功能，其效应优于AS-IV单独作用。AS-IV协同IL-13促进M2型巨噬细胞高表达TGF-β，随后TGF-β信号通路对NIH3T3细胞功能活性产生调节作用。 结论： AS-IV通过调节巨噬细胞向M2型极化，影响成纤维细胞的趋化、增殖和分泌等生物学功能，进而促进伤口组织ECM生成和新生血管形成，从而有利于糖尿病皮肤伤口组织的修复。
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