蓝莓腐败菌的分离鉴定及复配多糖抑菌作用研究

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中文摘要：蓝莓属于浆果类果实，含水量高，采后蓝莓果实极易腐烂，发生失水、腐烂等现象，不耐贮藏，这一特性极大地限制了蓝莓的鲜果的货架期和商品价值。本文对蓝莓腐败菌进行分离鉴定，采用三种多糖进行抑菌活性研究，确定最佳多糖复配比例，研究复配多糖对蓝莓腐败菌的抑菌活性、稳定性和抑菌机理。 (1)蓝莓致腐菌的分离鉴定。以蓝莓为研究对象，对蓝莓致腐菌进行分离与鉴定，通过对蓝莓贮藏中致腐菌进行分离，依据菌落形态的观察以及生理生化试验，参考《伯霉菌鉴定手册》和《酵母菌的特征与鉴定手册》，再根据分子生物学鉴定结果:确定酵母Y1为孢汉逊酵母（Hanseniaspora guilliermondii），确定酵母Y2为隐球酵母（Cryptococcus aureus）。 (2)三种多糖的抑菌活性研究。采用水提法提取松针、艾蒿和蒿本三种多糖，用滤纸片法对多糖的抑菌活性作出了分析研究，确定三种多糖的最低抑菌浓度，再对其进行最佳复配比正交试验，以抑菌圈直径为衡量指标，结果表明:影响因素的主次顺序为:松针多糖＞艾蒿多糖＞蒿本多糖，其最佳复配比为松针多糖∶艾蒿多糖∶蒿本多糖为3∶3∶2。表明复配多糖具有良好的抑菌活性，不仅为多糖的抑菌作用研究提供参考，而且为天然食品防腐剂的开发利用奠定基础。 (3)复配多糖对蓝莓致腐菌抑菌及稳定性研究。采用滤纸片法研究复配多糖的抑菌活性，结果表明复配多糖对蓝莓致腐菌Y1和Y2均有较强的抑菌作用;复配多糖对大肠杆菌的最小抑制浓度为1.25mg/mL，对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑制浓度较高为2.5mg/mL;复配多糖对致腐菌Y1和Y2的最小抑制浓度为1.25mg/mL。稳定性试验结果:复配多糖在中性、弱酸和弱碱性条件下抑菌活性较强，在酸性（碱性）条件下随pH值的降低（升高）抑菌活性下降;常见金属离子K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+对其稳定性影响不大，但三价金属Fe3+对其影响最大。 (4)多糖抑菌机理。从复配多糖对供试菌的生长曲线、细胞溶出物、菌体形态和相对电导率四个方面对复配多糖抑菌机理进行初步探讨。与对照生长曲线相比，经多糖处理过的菌种生长曲线明显下降;通过扫描电镜观察发现，对于多糖处理后的菌体出现明显的溢裂，表面形成沟痕，并且伴有一定的萎缩迹象，菌体表面变得粗糙，并且发生严重的断裂和溶解;随着复配多糖浓度的增加，各供试菌种细胞溶出物的释放量明显提高;供试菌种多糖处理液的电导率随着处理时间的延长，各菌种的胞内离子的泄漏程度不断增大，因此细胞内环境的稳定性会受到破坏。当离子外流达到一定程度时，细胞就会由于代谢紊乱或溶胀破裂而死亡。

作者：

孙义玄

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关键词：

蓝莓腐败菌细菌分离细菌鉴定复配多糖抑菌活性

授予学位：

硕士

学科专业：

食品科学

导师：

包怡红

学位年度：

2016

学位授予单位：

东北林业大学

语种：

中文

中图分类号：