摘要
本论文分为两部分:(1)2α-羟基原人参二醇(GP)的结构修饰与激活AMPK的构效关系研究;(2)雪胆甲素(XD)的结构修饰与激活AMPK的构效关系研究。 腺苷5'-单磷酸-活化蛋白激酶（AMPK）在调节体内糖脂代谢，维持机体能量稳态方面发挥着重要作用，目前AMPK已成为肥胖、糖尿病等领域重点研究的药物靶点。 绞股蓝有“南方人参”的美誉，以绞股蓝总皂苷为主要成分开发的药物是预防和治疗中、老年人高血脂的首选药。本课题组前期研究发现，绞股蓝皂苷的水解产物2α-羟基原人参二醇(GP)不仅在分子水平较好的激活重组人源AMPKα2β1γ1(EC50∶5.1μM)，而且在小鼠体内也显示出良好的降脂效果;此外，GP侧链C-24，25位双键在小鼠体内会发生氧化代谢。因此，为了考察GP侧链双键对活性的影响，探究GP激动AMPK的构效关系，明确其调节糖脂代谢的作用机制。我们以GP为先导，设计、合成了20个包括GP代谢产物在内的GP衍生物，并测试其对AMPK磷酸化的激动活性。结果表明:化合物12、17、18和19（EC50∶0.3、0.8、0.8和1.0μM）显示出了比阳性对照AMP(EC50∶1.4μM)更好的效果。进一步的细胞活性评价发现酶激动活性最好的化合物12和17在不影响线粒体膜电位和产生细胞毒的情况下，能显著增加AMPK的磷酸化，抑制HepG2细胞的糖输出。 雪胆在我国已有悠久的用药历史，其抗菌消炎、保肝等活性得到广泛临床应用。通过与已报道的葫芦烷型AMPK激动剂结构类似性搜索和活性测试，我们发现中药雪胆的量丰抗炎药效成分雪胆甲素(XD)具有较好的AMPKα2β1γ1激动活性，EC50为8.3μM。为了进一步提高雪胆甲素激动AMPK磷酸化的活性，我们设计、合成了14个XD衍生物。通过活性测试，发现XD-4、XD-8和XD-12活性最好(EC50∶1.7、1.8和0.6μM)，其中XD-12比母体化合物提高了近15倍。在原代肝细胞模型上，XD-4显示出较好抑制糖输出的作用。 本文的研究工作，不仅为充分开发和利用绞股蓝和雪胆降糖、降脂功效提供了依据，还为以后从量丰三萜类天然产物中发现其他具有激活AMPK磷酸化活性的化合物提供了借鉴和参考。
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