摘要
醇沉和逆流萃取是中成药生产中分离杂质和有效成分的重要精制单元，通常是制药过程中的关键环节，对后续工艺和药品质量均有重要作用。金银花和青蒿是热毒宁注射液的处方药材之一，其提取物的精制水平直接影响制剂成品的质量。本文以金青水提液为研究对象，开展金青醇沉和逆流萃取精制工艺的研究，重点考察了影响精制工艺的各关键质控因素并进行优化，具有一定的应用价值。本文的主要研究内容包括以下四个方面: 1.采用高效液相色谱法，建立一种可同时检测金青提取物中6种主要有效成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C）的定量方法，并进行了方法学验证。结果显示，在该色谱条件下，各绿原酸类成分的线性关系（r2＞0.999）和稳定性(RSD＜2％)良好，且方法的精密度、重复性和加样回收率良好(RSD＜2％)。 2.基于对金青醇沉生产工艺的全面监测，建立定性和定量辨识实际生产中关键质控风险因素的方法。采用因果图、潜在失效模式和效果分析，初步定性辨识潜在质控风险因素。随机采集测定醇沉正常生产过程样品，并同步监测潜在风险因素，建立了6个有效成分回收率和固含物去除率等7个指标的风险因素定量模型，并由模型最终获得现行金青醇沉生产工艺的关键质控风险因素:乙醇加入量和浸膏密度。结果表明，须根据质控要求适当缩小该参数的控制范围。 3.以6种有效成分的回收率和纯度，固含物去除率等为指标，全面考察了金青醇沉过程中8个工艺因素的影响特性，初步探讨醇沉损失机理，并采用多成分多指标法综合优选了金青醇沉工艺。结果表明，药液密度、加醇量、醇沉温度、药液pH、初醇浓度等因素对金青醇沉有显著影响，而药液温度、加醇温度、搅拌速度等影响不大。优化的醇沉工艺条件为:药液密度1.16±0.01 g·mL-1，加醇量3.5±0.3 mL·mL-1，醇沉温度0±1℃，乙醇浓度90±1％。 4.采用部分因子设计实验，筛选获得影响饱和乙酸乙酯逆流萃取金青浓缩药液的关键因素:药液固含量、加酸量（药液pH）、萃取剂倍量。进一步采用中心组合设计-响应面法，以6种有效成分回收率和总糖去除率为考察指标，利用满意度函数优选金青逆流萃取精制工艺的优化条件。结果表明，当加酸量为6.10 g(0.07625 g·g-1)、药液固含量为41.6％、萃取剂倍量为12.5 g·g-1时，7个指标均达到满意的优化值，此时新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的回收率分别为48.9±0.4％、76.8±0.9％、75.3±0.8％、93.9±0.9％、91.2±1.1％、91.3±0.7％，总糖去除率为97.5±0.2％。金青药液中总绿原酸的含量可由萃取前的9.79％提高到54.9％。
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